Development and Validation of Cannabinoid Quantification Method in Cannabis sativa L. Ethanol Extract by Ultra High Performance Liquid Chromatography
Main Article Content
บทคัดย่อ
บทนำและวัตถุประสงค์: กัญชา (Cannabis sativa L.) ได้ถูกนำมาใช้ทางการแพทย์ตั้งแต่สมัยโบราณ สารสำคัญที่พบในกัญชา คือ เตตร้าไฮโดรแคนนาบินอล ซึ่งเป็นสารที่ออกฤทธิ์ต่อจิตประสาท และสารที่ไม่ออกฤทธิ์ต่อจิตประสาท เช่น แคนนาบิดิออล ปัจจุบันกัญชาถูกนำมาใช้เป็นองค์ประกอบทางยาและผลิตภัณฑ์สุขภาพที่หลากหลาย อย่างไรก็ตามยังขาดวิธีการควบคุมคุณภาพสารที่พบในสารสกัดกัญชาอย่างเหมาะสม การวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาการพัฒนาวิธีการวิเคราะห์ปริมาณแคนนาบินอยด์ในสารสกัดกัญชาด้วยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (Ultra High Performance Liquid Chromatography: UHPLC)
วิธีการศึกษา: แบ่งเป็น 3 ขั้นตอน ได้แก่ (1) การพัฒนาวิธีวิเคราะห์ปริมาณสารแคนนาบิดิออล และเตตร้าไฮโดรแคนนาบินอลในสารสกัดกัญชาด้วยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (2) การทดสอบความใช้ได้ของวิธีวิเคราะห์ และ(3) การวิเคราะห์ปริมาณสารแคนนาบิดิออลและเตตร้าไฮโดรแคนนาบินอลในสารสกัดกัญชา จำนวน 10 ตัวอย่าง
ผลการศึกษา: ผลการทดสอบความใช้ได้ของวิธีวิเคราะห์ดังกล่าว พบว่ากราฟมาตรฐานของแคนนาบิดิออล และเตตร้าไฮโดรแคนนาบินอล มีลักษณะเป็นเส้นตรงในช่วงความเข้มข้น 24.23-290.70 และ 23.98-383.62 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร ตามลำดับ โดยมีค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ เท่ากับ 0.999, ค่าร้อยละของการคืนกลับอยู่ในช่วง 98.99-100.47 ขีดจำกัดของการตรวจพบของแคนนาบิดิออล และเตตร้าไฮโดรแคนนาบินอล มีค่าเท่ากับร้อยละ 1.015 และ 2.135 โดยน้ำหนักของสารสกัดกัญชา (ไมโครกรัม/ไมโครกรัม) ตามลำดับ ในขณะที่ขีดจำกัดของการวัดเชิงปริมาณมีค่าเท่ากับร้อยละ 3.382 และ 7.118 โดยน้ำหนักของสารสกัดกัญชา (ไมโครกรัม/ไมโครกรัม) ตามลำดับ
อภิปรายผล: การพัฒนาวิธีวิเคราะห์ปริมาณสารแคนนาบิดิออล และเตตร้าไฮโดรแคนนาบินอลในสารสกัดกัญชาด้วยวิธี UHPLC ที่พัฒนาขึ้น สามารถใช้ตรวจสอบสารสกัดกัญชา ผลการทดสอบความใช้ได้ของวิธีวิเคราะห์พบว่าทุกค่าอยู่ในเกณฑ์ยอมรับได้ อีกทั้งวิธีนี้ใช้เวลาในการวิเคราะห์ไม่นาน และวิธีการเตรียมวัฏภาคเคลื่อนที่ง่าย สะดวก และรวดเร็ว
ข้อสรุป: วิธีวิเคราะห์ที่พัฒนาขึ้นนี้มีความเหมาะสม สามารถนำไปใช้เป็นวิธีมาตรฐานสำหรับตรวจวิเคราะห์ปริมาณสารแคนนาบิดิออล และเตตร้าไฮโดรแคนนาบินอลในสารสกัดกัญชา ตลอดจนเป็นข้อมูลพื้นฐานในการกำหนดเกณฑ์ปริมาณสารสำคัญในสารสกัดกัญชาต่อไป
Article Details

อนุญาตภายใต้เงื่อนไข Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
เอกสารอ้างอิง
Boonyaprapat N, Chokchaicharoenporn O. Medicinal plants indigenous to Thailand. Bangkok: Prachachon; 1999. 3(1): p. 693. (in Thai)
Mechoulam R, Hanuš LO, Pertwee R, Howlett AC. Early phytocannabinoid chemistry to endocannabinoids and beyond. Nature Reviews Neuroscience. 2014; 15:757.
Velasco G, Sánchez C, Guzmán M. Towards the use of cannabinoids as antitumour agents. Nature Reviews Cancer. 2012; 12:436.
Radapong S, Suppajariyawat P, Phadungkit M. Pharmacological and toxicological effects of cannabis. The Bulletin of the Department of Medical Sciences. 2021;63(1):221-4. (in Thai)
Veniero G, Lucia D, Fiorenza F, Rino F, Elisa S, Giovanna T. Determination of primary active constituents in Cannabis preparations by high-resolution gas chromatography/flame ionization detection and high-performance liquid chromatography/UV detection. Analytica Chimica Acta. 2002;468:245–54.
Ciolino LA, Ranieri TL, Taylor AM. Commercial cannabis consumer products part 2: HPLC-DAD quantitative analysis of cannabis cannabinoids. Forensic Sci Int. 2018;289:438-47.
Department of Medical Science. Practical guidelines for testing the accuracy of chemical analysis methods in the single laboratory setting. Nonthaburi: Department of Medical Science; 2006.
ICH Q2 (R1): Validation of Analytical Procedures: Text and Methodology. 2005.
Thongchin T, Marsud S, Thiemthieprat P, Ruengkhet S, Ontong S, Banyati P, Chaisomboonpan S, Shuayprom A. Development and method validation of cannabinoid contents in Cannabis sativa L. leaves by Ultra High Performance Liquid Chromatography. The Bulletin of the Department of Medical Sciences. 2021;63(3):505-23. (in Thai)
Thongchin T, Thiemthieprat P, Ruengkhet S, Marsud S, Ontong S, Chaisomboonpan S, Shuayprom A. Development of analytical methods and validation of Cannabinoid quantification methods in Cannabis sativa L. flowers by Ultra High Performance Liquid Chromatography. Journal of Thai Traditional & Alternative Medicine. 2024;22(3):685-88. (in Thai)