การศึกษาฤทธิ์ต้านออกซิเดชันของตำรับยาสาบาน

Main Article Content

อรุณพร อิฐรัตน์

บทคัดย่อ

บทนำและวัตถุประสงค์: ภาวะเครียดออกซิเดชันเกิดขึ้นจากความไม่สมดุลระหว่างสารออกซิแดนท์หรือ ROS ซึ่งนำไปสู่ความเสียหายของโปรตีน ไขมัน และดีเอ็นเอ รวมทั้งเพิ่มความเสี่ยงในการกลายพันธุ์ของดีเอ็นเอ โดยสารต้านอนุมูลอิสระมีความสำคัญอย่างยิ่งในการปกป้องเซลล์จากอนุมูลอิสระ สารต้านอนุมูลอิสระที่ได้จากสารอาหารมีบทบาทสำคัญในการต้านสภาวะเครียดออกซิเดชัน และการขาดแคลนสารต้านอนุมูลอิสระเหล่านี้ม ส่งผลให้เกิดโรคเรื้อรังและมะเร็ง สารต้านอนุมูลอิสระจากพฤกษเคมี เช่นวิตามิน C, E และ K หรือสารสีพืช เช่น แคโรทีนอยด์ และสารเมตาบอไลต์ทุติยภูมิ เช่นฟีนอลิกและโพลีฟีนอล ตำรับยาสาบานเป็นยาสมุนไพรที่ใช้เพื่อบรรเทาอาการให้แก่ผู้ป่วยมะเร็งที่อโรคยศาลา วัดคำประมง แต่อย่างไรก็ตามยังไม่มีหลักฐานทางวิทยาศาสตร์ที่ที่เกี่ยวข้องกับตำรับยานี้ ดังนั้นตำรับยาสาบานและสมุนไพรในตำรับ จะถูกนำไปใช้ในการสกัดด้วยสองวิธีคือ การหมักและการต้มน้ำ โดยสารสกัดเหล่านี้จะถูกนำไปทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระด้วยวิธีการต่างๆ นอกจากนี้ สารสกัดจะถูกตรวจสอบปริมาณฟีนอลิกและฟลาโวนอยด์ทั้งหมดด้วย


ผลการศึกษา: สารสกัดชั้นเอทานอลของตำรับยาสาบานและสมุนไพรในตำรับ มี%Yield ต่ำกว่าสารสกัดชั้นน้ำ และจากการทดสอบปริมาณฟลาโวนอยด์รวมและปริมาณฟลินอลิกรวมสารสกัดชั้นเอทานอลของตำรับยาสาบาน พบว่ามีปริมาณฟลาโวนอยด์รวมและปริมาณฟลินอลิกรวมสูงกว่าสารสกัดชั้นน้ำ และจากการทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระด้วยวิธีการ DPPH assay พบว่าสารสกัดตำรับยาสาบานชั้นน้ำมีประสิทธิภาพดี โดยมีค่า EC50 เท่ากับ 7.98±0.98 µg/mL เมื่อเปรียบเทียบกับสารสกัดชั้นเอทานอล (EC50 = 27.92±0.89 µg/mL) และเมื่อทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระด้วยวิธี ABTS assay ของสารสกัดชั้นเอทานอลและชั้นน้ำของตำรับยาสาบาน พบว่า มีค่า EC50 ใกล้เคียงกัน คือสารสกัดชั้นเอาทานอล มีค่า EC50 เท่ากับ 1.06±0.20 และสารสกัดชั้นน้ำ มีค่า EC50 เท่ากับ 1.03±0.10 mg/mL และจากผลจากการทดสอบฤทธิ์ต้านอนมูลอิสระด้วยวิธี FRAP assay พบว่าสารสกัดเอทานอลและสารสกัดจากน้ำของตำรับยาสาบาน มีค่า FRAP เท่ากับ 264.86±10.75 และ 301.32±0.46 mg Fe2+ เทียบเท่าต่อกรัมสารสกัดตามลำดับ สารสกัดชั้นน้ำมีฤทธิ์ดีกว่าสารสกัดชั้นเทอานอล ซึ่งบ่งชี้ถึงศักยภาพในการเป็นผู้ให้อิเล็กตรอนเพื่อกำจัดอนุมูลอิสระ และจากผลการทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระด้วยวิธี NBT reduction assay พบว่าสารสกัดชั้นเอทานอลมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระสูงกว่าสารสกัดจากน้ำ


อภิปรายผล: สารพฤกษเคมีในพืชประเภท Polyphenols มีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ โดยการทำปฏิกิริยาโดยตรงกับอนุมูลอิสระ, การให้อิเล็กตรอนเพื่อทำให้อนุมูลอิสระมีเสถียรภาพ และป้องกันความเสียหายที่เกิดขึ้นกับเซลล์ จากผลการศึกษาชี้ให้เห็นว่าสารสกัดชั้นเอทานอลมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระมากกว่าสารสกัดชั้นน้ำในฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระที่ทำปฏิกิริยากันในเซลล์ ซึ่งแสดงถึงสารที่มีฤทธิ์ป้องกันภาวะเครียดออกซิเดชันภายในเซลล์ได้ แต่สารสกัดจากน้ำแสดงฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระที่เหนือกว่าในการทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระที่ทำปฏิกิริยากันของสารเคมี โดยแสดงค่า EC50 ที่ต่ำกว่าในการทดสอบด้วยวิธี DPPH และ ABTS ซึ่งความแตกต่างในฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระตามวิธีต่างๆ เกิดจากความแตกต่างในชนิดของอนุมูลอิสระและเทคนิคการวัด โดยผลการศึกษานี้มีความแตกต่างจากการศึกษาในอดีต เป็นผลมาจากความหลากหลายของสมุนไพร ซึ่งได้รับอิทธิพลจากปัจจัยต่างๆ เช่น สถานที่ปลูก, การเก็บเกี่ยว, เวลาที่ปลูก เป็นต้น


ข้อสรุปและข้อเสนอแนะ: การศึกษานี้บ่งชี้ว่าตำรับยาสาบาน แสดงฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระที่สามารถยับยั้งสารออกซิแดนท์หรือ ROS ได้หลายประเภท จากการทดสอบด้วยวิธี DPPH, ABTS, FRAP, NBT reduction assays

Article Details

ประเภทบทความ
Original Articles

เอกสารอ้างอิง

Reuter S, Gupta SC, Chaturvedi MM, Aggarwal BB. Oxidative stress, inflammation, and cancer: How are they linked? Free Radical Biology and Medicine. 2010;49(11):1603–16.

Gupta RK, Singh N. Morinda citrifolia (Noni) alters oxidative stress marker and antioxidant activity in cervical cancer cell lines. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention. 2013;14(8):4603-6.

Gupta RK, Patel AK, Shah N, Choudhary AK, Jha UK, Yadav UC, Gupta PK, Pakuwal U. Oxidative stress and antioxidants in disease and cancer: a review. Asian Pacific journal of cancer prevention. 2014;15(11):4405-9.

Bors W, Michel C. Chemistry of the antioxidant effect of polyphenols. Annals of the New York Academy of Sciences. 2002;957(1):57-69.

Poonthananiwatkul B, Howard RL, Williamson EM, Lim RH. Cancer patients taking herbal medicines: A review of clinical purposes, associated factors, and perceptions of benefit or harm. Journal of ethnopharmacology. 2015 Dec 4;175:58-66.

Miliauskas G, Venskutonis PR, Van Beek TA. Screening of radical scavenging activity of some medicinal and aromatic plant extracts. Food Chemistry. 2004; 85(2): 231-7.

Zhu H, Wang Y, Liu Y, Xia Y, Tang T. Analysis of flavonoids in Portulaca oleracea L. by UV–vis spectrophotometry with comparative study on different extraction technologies. Food Analytical Methods. 2010;3(2):90-7.

Yamasaki K, Hashimoto A, Kokusenya Y, Miyamoto T, Sato T. Electrochemical method for estimating the antioxidative effects of methanol extracts of crude drugs. Chemical and pharmaceutical bulletin. 1994 Aug 15;42(8):1663-5.

Re R, Pellegrini N, Proteggente A, Pannala A, Yang M, Rice-Evans C. Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay. Free Radical Biology and Medicine. 1999;26(9–10):1231–7.

Benzie IFF, Strain JJ. The Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP) as a Measure of “Antioxidant Power”: The FRAP Assay. Analytical Biochemistry. 1996;239(1):70–6.

Pulido R, Bravo L, Saura-Calixto F. Antioxidant Activity of Dietary Polyphenols As Determined by a Modified Ferric Reducing/Antioxidant Power Assay. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2000;48(8):3396–402.

Firuzi O, Lacanna A, Petrucci R, Marrosu G, Saso L. Evaluation of the antioxidant activity of flavonoids by “ferric reducing antioxidant power” assay and cyclic voltammetry. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - General Subjects. 2005;1721(1–3):174–84.

Srisawat U, Panunto W, Kaendee N, Tanuchit S, Itharat A, Lerdvuthisopon N, Hansakul P. Determination of phenolic compounds, flavonoids, and antioxidant activities in water extracts of Thai red and white rice cultivars. Journal of the Medical Association of Thailand= Chotmaihet thangphaet. 2010;93:S83-91.

Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxicity assays. Journal of Immunological Methods. 1983;65(1–2):55–63.

Agarwal A, Cho CL, Sharma R. Laboratory Evaluation of Reactive Oxygen Species. In: Encyclopedia of Reproduction [Internet]. Elsevier; 2018 [cited 2024 May 31]. p. 78–84. Available from: https://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/B9780128012383648419

Aryal S, Baniya MK, Danekhu K, Kunwar P, Gurung R, Koirala N. Total Phenolic Content, Flavonoid Content and Antioxidant Potential of Wild Vegetables from Western Nepal. Plants. 2019 Apr 11;8(4):96.

Sáez V, Pastene E, Vergara C, Mardones C, Hermosín-Gutiérrez I, Gómez-Alonso S, Gómez M, Theoduloz C, Riquelme S, von Baer D. Oligostilbenoids in Vitis vinifera L. Pinot Noir grape cane extract: Isolation, characterization, in vitro antioxidant capacity and anti-proliferative effect on cancer cells. Food Chemistry. 2018;265:101–10.

Zulkhairi A, Abdah MA, Kamal NHM, Nursakinah I, Moklas MA, Hasnah B, Fazali, F, Khairunnur FA, Kamilah KAK, Zamree MS, Shahidan MMA. Biological Properties of Tinospora crispa (Akar Patawali) and Its Antiproliferative Activities on Selected Human Cancer Cell Lines. Malays J Nutr. 2008;14(2):173–87.

Zulkefli H, Mohamad J, Zainal Abidin N. Antioxidant Activity of Methanol Extract of Tinospora crispa and Tabernaemontana corymbosa. Sains Malaysiana. 2013;42:697–706.

Ibahim M, Wan-Nor I, Hasani N, Zainurdin N, Nur S S, Froemming G. Anti-proliperative and antioxidant effects of Tinospora crispa (Batawali). Biomedical Research. 2011;22:57–62.

Nandagaon VS, Kulkarni AR. In vitro antioxidant and cytotoxicity activity of bacopa monnieri and baliospermum montanum muell arg. International Journal of Pharmaceutical Application. 2013;4(3):63–7.

Nguyen V, Sakoff J, Scarlett C. Physicochemical Properties, Antioxidant and cytotoxic activities of arude extracts and fractions from Phyllanthus amarus. Medicines. 2017;18;4(2):42.

Singharachai C, Palanuvej C, Kiyohara H, Yamada H, Ruangrungsi N. Safety Evaluation of Thai Traditional Medicine Remedy: Ben-Cha-Lo-Ka-Wi-Chian. Journal of Health Research. 2017;25(2):83–90.

Maruthappan V, Shree KS. A report on the antioxidant activity of the powder of the entire plant of Phyllanthus reticulatus Poir. International Journal of Green Pharmacy (IJGP). 2010;4(4):265-9

Eldeen IMS, Seow EM, Abdullah R, Sulaiman SF. In vitro antibacterial, antioxidant, total phenolic contents and anti-HIV-1 reverse transcriptase activities of extracts of seven Phyllanthus sp. South African Journal of Botany. 2011;77(1):75–9.