ฤทธิ์ต้านเชื้อแบคเรียดื้อยาและปริมาณองค์ประกอบทางเคมีของสารสกัดสมุนไพรตำรับอาโปธาตุและการศึกษาความคงตัว
Main Article Content
บทคัดย่อ
บทนำและวัตถุประสงค์ ตำรับยาอาโปธาตุที่ 21 มีฤทธิ์ยับยั้งเชื้อแบคทีเรียที่ก่อให้เกิดโรคท้องเสียหลายชนิดและมีสารองค์ประกอบหลักคือ brazilin และ gallic acid แต่ยังไม่เคยมีการทดสอบกับเชื้อแบคทีเรียดื้อยาปฏิชีวนะ รวมถึงความคงตัวของฤทธิ์ต้านเชื้อแบคทีเรียดื้อยาและปริมาณสารองค์ประกอบทางเคมีชนิดอื่น ๆ นอกเหนือจาก brazilin และ gallic acid มาก่อน วัตถุประสงค์ของการศึกษาในครั้งนี้เพื่อทดสอบฤทธิ์ของสารสกัดตำรับอาโปธาตุที่ 21ในการยับยั้งเชื้อ extended-spectrum beta-lactamase-producing Escherichia coli หรือ ESBL-E. coli และปริมาณองค์ประกอบทางเคมี ความคงตัวของสารสกัดภายใต้สภาวะเร่ง
วิธีการศึกษา ตำรับยาอาโปธาตุถูกสกัดด้วยวิธีการต้มน้ำ จากนั้นจึงนำไปศึกษาฤทธิ์ต้านเชื้อแบคทีเรียโดยใช้เทคนิค broth microdilution assay และวิเคราะห์ปริมาณสารสำคัญด้วยเทคนิคโครมาโทรกราฟี สารสกัดถูกทดสอบความคงตัวภายใต้สภาวะเร่งโดยทำการทดสอบเป็นเวลา 6 เดือน โดยสารสกัดจะถูกนำไปทดสอบฤทธิ์ต้านเชื้อแบคทีเรียและวิเคราะห์ปริมาณสารสำคัญ
ผลการศึกษา สารสกัดตำรับยาอาโปธาตุที่ 21 มีฤทธิ์ยับยั้ง ESBL-E. coli โดยมีค่า MIC อยู่ในช่วง 0.625–2.5 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร สารเคมีที่เป็นองค์ประกอบหลักในสารสกัดคือสาร protosappanin B โดยมีปริมาณ 2.89 ± 0.21%w/w เมื่อทำการทดสอบความคงตัวของสารสกัดพบว่าสารสกัดตำรับยาอาโปธาตุที่ 21 มีความคงตัวในการออกฤทธิ์โดยพบว่าฤทธิ์ยับยั้งเชื้อ E. coli ไม่มีการเปลี่ยนแปลง แต่พบการเปลี่ยนแปลงของปริมาณสาร protosappanin B เมื่อทดสอบความคงตัวในวันที่ 120 แต่เมื่อผ่านไป 180 วันพบว่าปริมาณสารดังกล่าวไม่มีความแตกต่างจากวันที่เริ่มต้นทำการทดสอบ
อภิปรายผล สารสกัดตำรับยาอาโปธาตุที่ 21 สามารถยับยั้งเชื้อแบคทีเรียที่ดื้อต่อยาปฏิชีวนะได้ แต่สารเคมีที่เป็นองค์ประกอบหลักคือ protosappanin B ซึ่งแตกต่างจากการศึกษาก่อนหน้า อาจเป็นเพราะความแตกต่างของฤดูกาลและสภาพอากาศซึ่งมีผลต่อปริมาณสารเคมีในสมุนไพรที่เป็นส่วนประกอบของตำรับทำให้สารเคมีที่เป็นองค์ประกอบหลักเปลี่ยนแปลงไป แต่อย่างไรก็ตาม สารสกัดดังกล่าวยังคงมีฤทธิ์ยับยั้งเชื้อแบคทีเรียและมีความคงตัวของการออกฤทธิ์ แต่ปริมาณสารไม่คงตัวซึ่งอาจเกิดจากความชื้นและอุณหภูมิในการทดสอบความคงตัวที่ทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงของสารเคมีในตำรับ
ข้อสรุปและข้อเสนอแนะ จากการศึกษาสามารถสรุปได้ว่าสารสกัดตำรับยาอาโปธาตุสามารถยับยั้งเชื้อแบคทีเรีย ESBL-E. coli ที่ได้ และมีปริมาณสารองค์ประกอบหลักคือสาร protosappanin B โดยหลังจากทดสอบความคงตัวเป็นเวลา 180 วัน สารดังกล่าวไม่มีการเปลี่ยนแปลงเมื่อเทียบกับวันที่ 0 อย่างไรก็ตาม ปริมาณสาร protosappanin B มีค่าเพิ่มขึ้นเมื่อทดสอบภายใต้สภาวะเร่งที่ 120 วัน ดังนั้น สารสกัดดังกล่าวควรมีการเก็บรักษาในที่อุณหภูมิและความชื้นต่ำเพื่อป้องกันการเปลี่ยนแปลงของสารสำคัญ ในการนำยาตำรับดังกล่าวไปใช้ควรต้องมีการทดสอบความเป็นพิษก่อนที่จะนำไปทดสอบประสิทธิผลในคนต่อไป
Article Details

อนุญาตภายใต้เงื่อนไข Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
เอกสารอ้างอิง
World Health Organization (WHO). Antimicrobial resistance [Internet]. 2023. [cited 2024 May 3]. Available from: https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/antimicrobial-resistance.
Rossolini G, Arena F, Pecile P, Pollini S. Update on the antibiotic resistance crisis. Current Opinion in Pharmacology. 2014;18:56-60.
Hawser SP, Bouchillon SK, Hoban DJ, Badal RE. In vitro susceptibilities of aerobic and facultative anaerobic gram-negative bacilli from patients with intra-abdominal infections worldwide from 2005–2007: results from the SMART study. International journal of antimicrobial agents. 2009;34(6):585-8.
Sawatwong P, Sapchookul P, Whistler T, Gregory CJ, Sangwichian O, Makprasert S, Jorakate P, Srisaengchai P, Thamthitiwat S, Promkong C, Nanvatthanachod P, Vanaporn M, Rhodes J. High burden of extended-spectrum β-lactamase–producing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae bacteremia in older adults: A seven-year study in two rural Thai provinces. American Journal of Tropical Medicine and Hygiene. 2019;100(4):943-51.
Wongut-sa P. Extended-spectrum β-lactamases producing in Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae isolated from specimens of patients in Ratchaburi hospital (2009-2013). Region 4 Medical Journal. 2015;17(3):222-9. (in Thai)
Karaket C. The prevalence of extended spectrum beta-lactamase producing in K.pneumoniae and E.coli at Chiang Kham hospital during 2011-2012. Phichit hospital journal. 2012;28:21-30. (in Thai)
Duksukkaew S. The prevalence of extended spectrum beta-lactamase producing in K. pneumoniae and E. coli at Phatthalung hospital. Region 11 Medical Journal. 2016;30(2):97-103. (in Thai)
Chomjan T, Singto P. Multiple-antimicrobial resistance (AMR) of patients in internal medicine department APHEIT. Journal of Nursing and Health. 2022;4(3):1-16. (in Thai)
Murray C, Ikuta KS, Sharara F, Swetschinski L, Robles Aguilar G, Gray A. Global burden of bacterial antimicrobial resistance in 2019: a systematic analysis. The Lancet. 2022;399(10325):629-55.
Ayurveda Thamrong Faculty of Medicine Siriraj Hospital Mahidol university. The textbook of Thai traditional medicine. Bangkok: Supavanit printing; 2007. 309 p. (in Thai)
Department of Thai Traditional and Alternative Medicine, Ministry of Public Health. Book on the medicine of King Narai. Bangkok: The War Veterans Organization of Thailand Printing; 1999. 180 p. (in Thai)
Panthong S, Sakpakdeejaroen I, Kuropakornpong P, Jaicharoensub J, Itharat A. Antibacterial activity and stability evaluation of “Apo-taat” remedy extract for inhibiting diarrhoea-causing bacteria. Tropical Journal of Natural Product Research. 2020;4(12):1101-7.
Bureau of Drug and Narcotic Department of Medical Sciences, Ministry of Public Health. Thai herbal pharmacopoeia 2021. Nonthaburi: Department of Medical Sciences, Ministry of Public Health; 2023
Tang W, Eisenbrand G. Caesalpinia sappan L. In: Chinese Drugs of Plant Origin. Berlin: Springer; 1992.
Zanin JLB, De Carvalho BA, Salles Martineli P, Dos Santos MH, Lago JHG, Sartorelli P, Viegas C, Soares MG. The genus Caesalpinia L.(Caesalpiniaceae): phytochemical and pharmacological characteristics. Molecules. 2012;17(7):7887-902.
Pattananandecha T, Apichai S, Julsrigival J, Ogata F, Kawasaki N, Saenjum C. Antibacterial activity against foodborne pathogens and inhibitory effect on anti-inflammatory mediators' production of brazilin-enriched extract from Caesalpinia sappan Linn. Plants (Basel, Switzerland). 2022;11(13):1698.
Batubara I, Mitsunaga T, Ohashi H. Brazilin from Caesalpinia sappan wood as an antiacne agent. Journal of Wood Science. 2010;56:77–81.
Monroy LV, Cauich JC, Ortega AM, Campos MS. Medicinal plants as potential functional foods or resources for obtaining anticancer activity metabolites. Oncological Functional Nutrition. Cambridge: Academic Press; 2021. p. 161-94.
Rajamanickam K, Yang J, Sakharkar MK. Gallic acid potentiates the antimicrobial activity of tulathromycin against two key bovine respiratory disease (BRD) causing-pathogens. Frontiers in pharmacology. 2019;9:1486.
De R, Sarkar A, Ghosh P, Ganguly M, Karmakar BC, Saha DR, Halder A, Chowdhury A, Mukhopadhyay AK. Antimicrobial activity of ellagic acid against Helicobacter pylori isolates from India and during infections in mice. The Journal of antimicrobial chemotherapy, 2018;73(6):1595–603.
Vu TT, Kim H, Tran VK, Vu HD, Hoang TX, Han JW, Choi YH, Jang KS, Choi GJ, Kim, JC. Antibacterial activity of tannins isolated from Sapium baccatum extract and use for control of tomato bacterial wilt. PloS one. 2017;12(7):e0181499.
Herbal Product Division, Food and Drug Administration. Guidline of apply for herbal products permission [Internet]. 2023. [cited 2024 Jan 25]. Available from: https://herbal.fda.moph.go.th/product/category/law-regis/. (in Thai)
Sarker SD, Nahar L, Kumarasamy Y. Microtitre plate-based antibacterial assay incorporating resazurin as an indicator of cell growth, and its application in the in vitro antibacterial screening of phytochemicals. Methods. 2007;42(4):321-4.
Kondo S, Apisarnthanarak A, Trakulsomboon S, Bootkotr W, Mingmalairak C, Mahawongkajit P, Juntong J, Limpavitayaporn P, Sriussadaporn E, Tongyoo A, Boonyasatid P, Chunsirisub T, Nakornchai K, Thowprasert W, Kiratisin P, Palittapongarnpim P. Prevalence of extended-spectrum β-lactamase-producing enterobacterales and distribution of blaESBL genes from patients who underwent abdominal surgery. Science & Technology Asia. 2022;27(4):104–16.
European Society of clinical microbiolagy and infectious diseases. EUCAST clinical breakpoint tables [Internet]. 2024 [cited 2024 Oct 19]; Available from: https://www.eucast.org/clinical_breakpoints.
ICH Harmonised Tripartite guideline. Validation of analytical procedures: text and methodology. Q2 (R1). 2005;1(20):05.
International Conference on Harmonization. Q1A(R2): Stability testing of new drug substances and products [Internet]. 2003. [cited 2024 Feb 02]; Available from: https://www.ich.org/products/guidelines.html.
Srichumporn W, Chaisowwong W, Intanon M, Na-Lampang K. Extended-spectrum beta-lactamase-producing Escherichia coli from pork in Muang district, Chiang Mai Province, Thailand. Veterinary world. 2022;15(12):2903–9.
Wang Z, Sun J-B, Qu W, Guan F-Q, Li L-Z, Liang J-Y. Caesappin A and B, two novel protosappanins from Caesalpinia sappan L. Fitoterapia. 2014;92:280-4.
O’Donnell G, Bucar F, Gibbons S. Phytochemistry and antimycobacterial activity of Chlorophytum inornatum. Phytochemistry. 2006;67(2):178-82.
Górniak I, Bartoszewski R, Króliczewski J. Comprehensive review of antimicrobial activities of plant flavonoids. Phytochemistry Reviews. 2019;18:241-72.
Zuo GY, Han ZQ, Han J, Hao XY, Tang HS, Wang GC. Antimicrobial activity and synergy of antibiotics with two biphenyl compounds, protosappanins A and B from Sappan lignum against methicillin-resistant Staphylococcus aureus strains. Journal of Pharmacy and Pharmacology. 2015;67(10):1439-47.
Aires A, Fernandes C, Carvalho R, Bennett RN, Saavedra MJ, Rosa EA. Seasonal effects on bioactive compounds and antioxidant capacity of six economically important brassica vegetables. Molecules. 2011;16(8):6816-32.
European Committee for Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) of the European Society of Clinical Microbiology and Infectious Diseases (ESCMID). Determination of minimum inhibitory concentrations (MICs) of antibacterial agents by agar dilution. EUCAST E Def. 2000;6(9):509-15.
Donkor MN, Donkor AM, Mosobil R. Combination therapy: synergism among three plant extracts against selected pathogens. BMC Research Notes. 2023;16(1):1-5.
Tian Q, Wei S, Su H, Zheng S, Xu S, Liu M, Bo R, Li J. Bactericidal activity of gallic acid against multi-drug resistance Escherichia coli. Microbial Pathogenesis. 2022;173(Pt A):105824.
Nirmal NP, Rajput MS, Prasad RG, Ahmad M. Brazilin from Caesalpinia sappan heartwood and its pharmacological activities: A review. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2015;8(6):421-30.
Warinhomhaun S, Sritularak B, Charnvanich D. A simple high-performance liquid chromatographic method for quantitative analysis of brazilin in Caesalpinia sappan L. extracts. Thai Journal of Pharmaceutical Sciences. 2018;42(4):208-13.
Insuan W, Sillawatthumrong N, Chahomchuen T, Khamchun S, Chueahongthong F, Insuan O. Brazilin content and potential biological properties of Caesalpinia sappan L. heartwood extracts from different extraction methods. Discover Applied Sciences. 2024;6:509.
Xia Z, Li D, Li Q. Zhang Y, Kang W. Simultaneous determination of brazilin and protosappanin B in Caesalpinia sappan by ionic-liquid dispersive liquid-phase microextraction method combined with HPLC. Chemistry Central Journal. 2017;11:114.
Chaphalkar R, Apte KG, Talekar Y, Ojha SK, Nandave M. Antioxidants of Phyllanthus emblica L. Bark extract provide hepatoprotection against ethanol-induced hepatic damage: a comparison with silymarin. Oxidative medicine and cellular longevity. 2017;3876040.