การพัฒนาวิธีวิเคราะห์ปริมาณเตตราไฮโดรแคนนาบินอลโดยวิธีเอชพีแอลซี และข้อกำ หนดทางเคมีฟิสิกส์ของช่อดอกเพศเมียและใบกัญชา

Main Article Content

ภูริทัต รัตนสิริ
Suphan Pattarapornchaiwat
Warunee Jirawattanapong

บทคัดย่อ

บทนำและวัตถุประสงค์: เนื่องจากยังไม่มีข้อกำหนดมาตรฐานในการควบคุมคุณภาพของช่อดอกเพศเมียและใบกัญชา งานวิจัยนี้จึงมุ่งศึกษาคุณภาพทางเคมีฟิสิกส์ของช่อดอกเพศเมียและใบกัญชา โดยจัดทำเอกลักษณ์ทางเคมี ประเมินคุณภาพทางเคมีฟิสิกส์พัฒนาวิธีวิเคราะห์ปริมาณสารสำคัญ และทดสอบความใช้ได้ของวิธีวิเคราะห์เพื่อใช้เป็นข้อมูลประกอบการจัดทำมอโนกราฟในตำรามาตรฐานยาสมุนไพรไทย


วิธีการศึกษา: ใช้ตัวอย่างช่อดอกเพศเมีย 23 ตัวอย่างและใบกัญชา16 ตัวอย่างศึกษาเอกลักษณ์ทางเคมีโดยใช้เตตราไฮโดรแคนนาบินอลและแคนนาบิไดออลเป็นสารมาตรฐานเปรียบเทียบ พร้อมประเมินคุณภาพทางเคมีฟิสิกส์ และพัฒนาวิธีวิเคราะห์เตตราไฮโดรแคนนาบินอลด้วยวิธีเอชพีแอลซีพร้อมตรวจสอบความใช้ได้ของวิธี


ผลการศึกษา: การศึกษาเอกลักษณ์ทางเคมีด้วยวิธีปฏิกิริยาการเกิดสีพบสารในกลุ่มแคนนาบินอยด์และเทอพีนอยด์ส่วนการวิเคราะห์ด้วยทีแอลซีพบสารเตตราไฮโดรแคนนาบินอลและแคนนาบิไดออลการประเมินคุณภาพทางเคมีฟิสิกส์ของช่อดอกเพศเมียกัญชา พบค่าเฉลี่ย ± ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานของปริมาณความชื้น ปริมาณเถ้ารวม ปริมาณเถ้าที่ไม่ละลายในกรดปริมาณสารสกัดด้วยน้ำ ปริมาณสารสกัดด้วยเอทานอลและปริมาณเตตราไฮโดรแคนนาบินอลเท่ากับร้อยละ 8.00 ± 0.68,12.94 ± 2.03, 1.96 ± 0.96, 18.51 ± 3.33, 17.64 ± 2.59 และ 1.95 ± 1.51 โดยน้ำหนักต่อน้ำหนัก ตามลำดับ ส่วนใบกัญชา มีค่าเท่ากับร้อยละ 7.83 ± 0.74,17.38 ± 3.07, 2.48 ± 1.70, 26.04 ± 2.54, 14.88 ± 3.39 และ 0.39 ± 0.23 โดยน้ำหนักต่อน้ำหนัก ตามลำดับ วิธีที่พัฒนาขึ้นมีความจำเพาะสูงใช้ได้ในช่วงความเข้มข้น 2–10 µg/mL ความสัมพันธ์เชิงเส้นตรง (R2) เท่ากับ 0.9998 ค่าการคืนกลับอยู่ในช่วงร้อยละ 97.71–103.15 ค่าความเที่ยงอยู่ในช่วงร้อยละ 0.08–0.36 ค่าความเข้มข้นน้อยที่สุดที่ตรวจพบได้และความเข้มข้นน้อยที่สุดที่หาปริมาณได้ เท่ากับ 0.08 และ 0.25 µg/mL ตามลำดับ


อภิปรายผล: การศึกษาเอกลักษณ์ทางเคมีของช่อดอกเพศเมียและใบกัญชา พบว่ามีปริมาณสารเตตราไฮโดรแคนนาบินอลและแคนนาบิไดออลแตกต่างกัน โดยพบสารแคนนาบิไดออลเพียงไม่กี่ตัวอย่าง ซึ่งอาจเกิดจากความแตกต่างของสายพันธุ์แหล่งปลูก และอายุการเก็บเกี่ยว ทั้งนี้ในแหล่งปลูกเดียวกัน พบว่าช่อดอกเพศเมียมีปริมาณเตตราไฮโดรแคนนาบินอลมากกว่าใบกัญชา ซึ่งสอดคล้องกับข้อมูลที่ระบุว่าช่อดอกเพศเมียเป็นแหล่งสะสมสารแคนนาบินอยด์หลักของพืชกัญชา การตรวจเอกลักษณ์ทางเคมีด้วยเทคนิคเอชพีแอลซีสามารถแยกสารมาตรฐานได้ 8 ชนิด จากการศึกษาคุณภาพทางเคมีฟิสิกส์พบว่าสามารถนำไปใช้เป็นแนวทางในการควบคุมคุณภาพของสมุนไพรกัญชา นอกจากนี้การพัฒนาวิธีวิเคราะห์ปริมาณเตตราไฮโดรแคนนาบินอลในช่อดอกเพศเมียและใบกัญชาด้วยเทคนิคเอชพีแอลซีพบว่าวิธีที่พัฒนาขึ้นมีความจำเพาะสูง มีความสัมพันธ์เชิงเส้นตรงสูง ค่าการคืนกลับและค่าความเที่ยงอยู่ในเกณฑ์ที่ยอมรับได้ตามมาตรฐานการวิเคราะห์ทางเภสัชกรรม และการใช้ระบบเอชพีแอลซีแบบเกรเดียนต์ช่วยลดระยะเวลาในการวิเคราะห์ได้อย่างมีประสิทธิภาพ


สรุป: ข้อกำหนดทางเคมีฟิสิกส์และวิธีวิเคราะห์ที่พัฒนาขึ้นนี้สามารถนำไปใช้จัดทำมาตรฐานของช่อดอกเพศเมียและใบกัญชาในตำรามาตรฐานยาสมุนไพรเพื่อเป็นมาตรฐานอ้างอิงระดับประเทศ

Article Details

ประเภทบทความ
Original Articles

เอกสารอ้างอิง

Hiilig K. Genetic evidence for speciation in cannabis (Cannabaceae). Genet Resour Crop Evol. 2005;52:161-80.

Narcotics Act (No. 7) B.E. 2562 (2019). Published in Government Gazette, vol. 136, Part 19A. (2019 Feb 18). (in Thai)

Whiting PF, Wolff RF, Deshpande S, Di Nisio M, Duffy S, Hernandez AV, Keurentjes JC, Lang S, Misso K, Ryder S, Schmidlkofer S, Westwood M, Kleijnen J. Cannabinoids for medical use: a systematic review and meta-analysis. JAMA. 2015;313(24):2456-73.

Goutopoulos A, Makriyannis A. From cannabis to cannabinergics: New therapeutic opportunities. Pharmacol Ther. 2002;95(2):103-17.

Russo E, Guy GW. A tale of two cannabinoids: the therapeutic rationale for combining tetrahydrocannabinol and cannabidiol. Med Hypotheses. 2006;66(2):234-46.

Kendall DA, Yudowski GA. Cannabinoid receptors in the central nervous system: their signaling and roles in disease. Front Cell Neurosci. 2017;10:294.

Russo EB. Cannabinoids in the management of difficult to treat pain. Ther Clin Risk Manag. 2008;4(1):245–59.

ElSohly MA, Slade D. Chemical constituents of marijuana: The complex mixture of natural cannabinoids. Life Sci. 2005;78(5):539-48.

Sarana S, Chuda C, Warintorn R, Pensak J. The cannabis terpenes. Molecules. 2020;25(24):5792.

Wang T, Collet JP, Shapiro S, Ware MA. Adverse effects of medical cannabinoids: a systematic review. CMAJ. 2008;178(13):1669-78.

Wagner H, Bladt S. Plant drug analysis—A thin-layer chromatography atlas. 2nd ed. Berlin: Springer Verlag; 1996. p. 260-1.

United Nations Office on Drugs and Crime (UNODC). Recommended methods for the identification and analysis of cannabis and cannabis products. New York: United Nations; 2009.

Jork H, Funk W, Fischer W, Wimmer H. Thin-layer chromatography—Reagents and detection methods. Vol 1a: Physical and chemical detection methods, fundamentals, reagents I. Weinheim: Wiley-VCH Verlag GmbH; 1990.

Department of Medical Sciences, Ministry of Public Health. Thai herbal pharmacopoeia. Vol II. Bangkok: The Agricultural Co-operative Federation of Thailand Limited; 2020.

Department of Medical Sciences. A practical guide for single laboratory method validation of chemical methods. Ministry of Public Health; 2006. (in Thai)

Notification of the Ministry of Public Health: Specification of Narcotic Drugs in Category 5 B.E. 2565 (2022). Published in Royal Thai Government Gazette. (2022 Feb 9). (in Thai)

Notification of the Narcotic Control Committee: Specification of Hemp Characteristics B.E. 2562 (2019). Published in Royal Thai Government Gazette. (2019 Oct 24). (in Thai)

Notification No. 427 B.E. 2564 (2021) issued under the Food Act B.E. 2522 (1979) regarding food products containing cannabis or hemp components. Published in Royal Thai Government Gazette. (2021 Jul 23). (in Thai)

Brighenti V, Marani M, Caroli C, Bertarini L, Gaggiotti A, Pollastro F, Durante C, Cannazza G, Pellati F. A new HPLC method with multiple detection systems for impurity analysis and discrimination of natural versus synthetic cannabidiol. Anal Bioanal Chem. 2024;416:4555-69.

Pathompak P, Chankana N, Vipunngeun N, Phonkrathok S. HPLC method development and validation for quantitation of CBD and THC in Suk-SaiYas Pills. J Curr Sci Technol. 2022;12(3):538-46.