The ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระและยับยั้งไนตริกออกไซด์ของสารสกัดจากตำรับยาแก้ลมอุทธังคมาวาตาในเซลล์ ATDC-5

บทคัดย่อ

บทนำและวัตถุประสงค์: โรคข้อเข่าเสื่อมเป็นโรคข้ออักเสบที่ทำให้พิการได้ ไนตริกออกไซด์ (NO) ถูกกำหนดให้เป็นหนึ่งในสาเหตุที่สำคัญของการเกิดการอักเสบในโรคข้อเข่าเสื่อม ซึ่งจากงานวิจัยหลายงานก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่า สารออกฤทธิ์ทางชีวภาพและสารสกัดจากพืชมีฤทธิ์ในการป้องกันโรคข้อเข่าเสื่อมโดยการยับยั้งการแสดงออกของ NO และการสังเคราะห์ inducible nitric oxide synthase (iNOS).การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อหาปริมาณสารฟีนอลิกและสารฟลาโวนอยด์ แล้วทำการทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระและฤทธิ์ยับยั้งการสร้างไนตริกออกไซด์ในเซลล์ ATDC-5 mouse chondrogenic รวมทั้งศึกษาความเป็นพิษต่อเซลล์ของสารสกัดเอทานอลจากตำรับยาแก้ลมอุทธังคมาวาตา

วิธีการศึกษา: หาปริมาณสารฟีนอลิกโดยวิธี Folin-ciocalteu และสารฟลาโวนอยด์โดยวิธี Aluminum chloride colorimetric assay แล้วทำการทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระโดย DPPH และ ABTS Assay ฤทธิ์ต้านการอักเสบด้วยวิธี NO assay ที่ถูกกระตุ้นด้วย lipopolysaccharide (LPS) ใน ATDC-5 mouse chondrogenic cell และศึกษาความเป็นพิษต่อเซลล์โดยวิธี MTT assay ของตำรับยาแก้ลมอุทธังคมาวาตาที่สกัด 95% เอทานอล

ผลการศึกษา: พบว่าสารสกัดตำรับยาแก้ลมอุทธังคมาวาตามีปริมาณฟีนอลิก เท่ากับ 479.33 ± 2.08 mg GAE/g extract. และ มีปริมาณฟลาโวนอยด์รวม เท่ากับ 177.89 ± 3.02 mg QE/g ext จากการทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระพบว่ายาแก้ลมอุทธังคมาวาตามีค่า IC₅₀ เท่ากับ 137.72 µg/ml เมื่อทดสอบด้วยวิธี DPPH และมี IC₅₀ เท่ากับ 27.28 µg/ml เมื่อทดสอบด้วยวิธี ABTS การศึกษาความเป็นพิษต่อเซลล์ ATDC-5 ของสารสกัดตำรับยาแก้ลมอุทธังคมาวาตา ที่ความเข้มข้น 3.125, 6.25, 25, 50 และ 100 µg/ml ซึ่งพิจารณาจากอัตราการรอดชีวิตของเซลล์ต้องไม่ต่ำกว่า 80% พบว่าที่ความเข้มข้นสูงสุดคือ 100 µg/ml ไม่ก่อให้เกิดความเป็นพิษต่อเซลล์แต่หากปรับเพิ่มเป็น 200 µg/ml พบว่าสารสกัดตำรับยาแก้ลมอุทธังคมาวาตาทำให้อัตราการรอดชีวิตของเซลล์ลดลง ผู้วิจัยถึงเลือกใช้ความเข้มข้นที่ 100 µg/ml เป็นความเข้มข้นสูงสุดในศึกษาฤทธิ์ต้านการอักเสบผ่านยับยั้งการสร้างไนตริกออกไซด์ โดยใช้ L-NA เป็นสารมาตรฐาน จากผลการทดสอบพบว่าสารสกัดตำรับยาแก้ลมอุทธังคมาวาตามีค่า IC₅₀ เท่ากับ 41.88 µg/ml

อภิปรายผล: การศึกษานี้ให้ข้อมูลว่ายาแก้ลมอุทธังคมาวาตาแสดงให้เห็นถึงฤทธิ์ในการต้านอนุมูลอิสระและต้านการอักเสบผ่านการยับยั้งไนตริกออกไซด์ซึ่งเกี่ยวข้องกับโรคข้อเข่าเสื่อม โดยน่าจะมาจากสารประกอบฟีนอลและฟลาโวนอยด์ ซึ่งมีความสำคัญต่อความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระและต้านการอักเสบ

ข้อสรุปและข้อเสนอแนะ: จากการศึกษาครั้งนี้ทำให้สรุปได้ว่าตำรับยาแก้ลมอุทธังคมาวาตาเป็นตำรับยาที่มีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระและต้านการอักเสบ จึงควรมีการศึกษาอื่น ๆ เพิ่มเติม เพื่อศึกษาความเป็นไปได้ในการนำไปใช้รักษาข้อเข่าเสื่่อมต่อไป