การพัฒนาวิธีวิเคราะห์สารกลุ่มไทรเทอร์พีนส์ในบัวบกด้วยวิธี UPLC
Article Sidebar
Main Article Content
บทคัดย่อ
บัวบก (Centella asiatica (L.) Urb., Apiaceae) เป็นสมุนไพรในบัญชียาหลักแห่งชาติ สารสำคัญในบัวบกเป็นสารกลุ่มไทรเทอร์พีนส์ และอนุพันธ์ ซึ่งมีฤทธิ์ทางชีวภาพที่หลากหลาย การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาวิธีวิเคราะห์ปริมาณสารสำคัญ ได้แก่ asiaticoside, madecassoside, asiatic acid และ madecassic acid ในบัวบกด้วยวิธี Ultra Performance Liquid Chromatography (UPLC) ในวัตถุดิบและสารสกัดบัวบก โดยสกัดสมุนไพรหรือละลายสารสกัดบัวบกด้วย methanol นำสารละลายตัวอย่างปริมาตร 4 ไมโครลิตร มาวิเคราะห์ด้วยเครื่อง UPLC โดยใช้คอลัมน์ AcquityTM UPLC column BEH C18, 2.1 x 50 มิลลิเมตร, 1.7 ไมโครเมตร และใช้ น้ำกลั่น และ acetonitrile เป็น mobile phase อัตราการไหล 0.6 มิลลิลิตร/นาที และตรวจวัดด้วย PDA ที่ความยาวคลื่น 205 นาโนเมตร ผลการทดสอบความใช้ได้ของวิธีวิเคราะห์ดังกล่าว พบว่า calibration curve ของ asiaticoside, asiatic acid และ madecassic acid มีลักษณะเป็นเส้นตรงในช่วงความเข้มข้น 0.01-0.1 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร และ สาร madecassoside มีลักษณะเป็นเส้นตรงในช่วงความเข้มข้น 0.03-0.21 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร ค่า coefficient (R2) เท่ากับ 0.999 ค่า % recovery อยู่ในช่วง 95-105% ค่า HORRAT เท่ากับ 0.06-0.3 ค่า LOD และ LOQ ของ asiaticoside, madecassoside, asiatic acid และ madecassic acid มีค่า LOD เท่ากับ 0.0021, 0.0080, 0.0114 และ 0.01309 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร ตามลำดับ และ LOQ เท่ากับ 0.0081, 0.0283, 0.0410 และ 0.0473 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร (ตามลำดับ) ซึ่งวิธีวิเคราะห์ที่พัฒนาขึ้นนี้มีความเหมาะสม และสามารถนำไปใช้เป็นวิธีตรวจวิเคราะห์สารกลุ่มไทรเทอร์พีนส์ และอนุพันธ์ ในวัตถุดิบและสารสกัดบัวบกต่อไป
Article Details
เอกสารอ้างอิง
Smitinand T. Thai plant names. Bangkok: Funny publishing company limited; 1980. p. 118. (in Thai)
Boonyaprapat N, Chokchaicharoenporn O. Medicinal Plants indigenous to Thailand. Bangkok: Prachachon; 2000. p. 508-15. (in Thai)
Hashim P, Sidek H, Helan MHM, Sabery A, Palanisamy UD, Ilhan M. Triterpene composition and bioactivities of Centella asiatica. Molecules. 2011;16:1310-22.
Yu QL, Duan HQ, Takaishi Y, Gao WY. A novel triterpene from Centella asiatica. Molecules 2006;11:661-5.
Grimaldi R, Ponti FD, Angelo L. D, Caravaggi M, Guidi G, Lecchini S, Frigo G.M, Crema A. Pharmacokinetics of the total triterpenic fraction of Centella asiatica after single and multiple administrations to healthy volunteers. a new assay for asiatic acid. J Ethnopharmacol. 1990;28(2):235-41.
National List of Essential Medicines (No. 2) B.E. 2554 (2011). Published in Government Gazette on 28 June B.E. 2554 (2011). (in Thai)
Sondari D, Harmami SB, Ghozali M, Randy A, Amanda A.S, Irawan Y. Determination of the active asiaticoside content in Centella asiatica as anti-cellulite agent. Indonesian Journal of Cancer Chemoprevention 2011;2(2):221–6
Inamdar P.K., Yeole R.D., Ghogare A.B., Souza de N.J. Determination of biologically active constituents in Centella asiatica. Journal of Chromatography A. 1996;742(1-2):127-30.
Tiwari R.K, Chanda S, Deepak M, Murli B, Agarwal A. HPLC method validation for simultaneous estimation of madecassoside, asiaticoside and asiatic acid in Centella asiatica. J Chem Pharm Res. 2010;2(3):223-9.
Thongnopnua P. High-performance liquid chromatographic determination of asiatic acid in human plasma. Thai Journal of Pharmaceutical Sciences. 2008;32:10-6.
Rafamantanana M.H, Rozet E, Raoelison G.E, Cheuk K, Ratsimamanga S.U, Hubert Ph, Quetin-Leclercq J. An improved HPLC-UV method for the simultaneous quantification of triterpenic glycosides and aglycones in leaves of Centella asiatica (L.) Urb (Apiaceae). J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2009;877(23):2396-402.
Jain PK, Agrawal RK. High performance liquid chromatographic analysis of asiaticoside in Centella asiatica (L.) Urban. Chiang Mai Journal of Science. 2008;35(3):521-5.
Chamnan Patarapanich, Bungon Kongthong, and Suwanna Laungchonlatan. A HPLC method for determination of asiaticoside, madecassoside, asiatic acid and madecassic acid in the extract of Centella asiatica Linn. development, validation and application. Thai J. Pharm. Sci. 2004;28:42.
Laungchonlathan S, Kongthong B, Patarapanich C. A TLC method determination of active constituents, madecassoside and asiaticoside from Centella asiatica Linn. in various seasons in Thailand. Thai J. Pharm. Sci. 2004;28:43.
James JT, Dubery IA. Identification and quantification of triterpenoid centelloids in Centella asiatica (L.) Urban by densitometric TLC. Journal of Planar Chromatography-Modern TLC. 2011;24(1):82-7.
The United States Pharmacopoeial Convention. The United States Pharmacopoeia, The National Formulary 39th revision. Rockville, MD.: The United States Pharmacopoeial Convention, Inc.; 2016. p. 6541–7.
Department of Medical Sciences. Thai Herbal Pharmacopoeia 2019. Bangkok: Prachachon Co., Ltd.; 2019.
Department of Medical Sciences. A practical guide for single laboratory method validation of chemical methods. Nonthaburi: Department of Medical Sciences; 2006. (in Thai).
