การศึกษาลายพิมพ์ดีเอ็นเอและความสัมพันธ์ทางพันธุกรรมของเห็ดหลินจือด้วยเครื่องหมายดีเอ็นเอชนิดไอเอสเอสอาร์
Main Article Content
บทคัดย่อ
เห็ดหลินจือ (Ganoderma lucidum) เป็นราขนาดใหญ่ชนิดหนึ่ง ได้นำมาใช้เป็นยาอายุวัฒนะและส่วนประกอบของยาพื้นบ้านมาเป็นเวลานานหลายปี. ปัจจุบันได้มีการเพาะเห็ดหลินจือในระดับอุตสาหกรรมและแปรรูปเป็นผลิตภัณฑ์เสริมสุขภาพ. วิธีการจำแนกสายพันธุ์เห็ดด้วยวิธีดั้งเดิม โดยใช้ลักษณะสัณฐานวิทยาไม่สามารถแยกความแตกต่างของสายพันธุ์เห็ดกลุ่มนี้ได้ เนื่องจากบางสายพันธุ์มีสัณฐานวิทยาใกล้เคียงกันมาก. งานวิจัยนี้ได้นำเทคนิคเครื่องหมายดีเอ็นเอชนิดไอเอสเอสอาร์ มาใช้ศึกษาลายพิมพ์ดีเอ็นเอและความสัมพันธ์ใกล้ชิดทางพันธุกรรมของเห็ดหลินจือจำนวน ๙ สายพันธุ์ คือ เอ็มจี๑ ถึงเอ็มจี๙ โดยทดสอบกับไพรเมอร์ ๑๖ ไพรเมอร์. จากการทดลองพบว่ามี ๑๑ ไพรเมอร์ที่สามารถเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรมของเห็ดทั้ง ๙ สายพันธุ์ได้ มีจำนวนแถบดีเอ็นเอทั้งหมด ๑๐๓ แถบ เป็นแถบที่ต่างกัน ๘๙ แถบ คิดเป็นร้อยละ ๘๖.๔๐ มีแถบดีเอ็นเอที่พบเฉพาะในบางสายพันธุ์ ๒๑ แถบ มีจำนวน ๗ ไพรเมอร์จาก ๑๑ ไพรเมอร์ ให้แถบดีเอ็นเอที่พบเฉพาะในตัวอย่างเอ็มจี๓เท่านั้น . การจัดกลุ่มตามความสัมพันธ์ใกล้ชิดทางพันธุกรรมพบว่าสายพันธุ์เอ็มจี๓ และเอ็มจี๔ มีความแตกต่างทางพันธุกรรมค่อนข้างสูง เมื่อเทียบกับอีก ๗ สายพันธุ์. ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าเทคนิดไอเอสเอสอาร์ สามารถนำมาใช้ศึกษาลายพิมพ์ดีเอ็นเอและใช้ระบุเอกลักษณ์ประจำสายพันธุ์ของเห็ดหลินจือได้.
Article Details
เอกสารอ้างอิง
2. http://www.bennon.ac.th/download/bennon/05042551.pdf, 9/03/2010
3. Moncalvo JM, Wang H, Hsen RS. Phylogenetic relationship in Ganoderma inferred from the internal transcribed spacers and 25S ribosomal DNA sequences. Mycologia 1995;87(2):223-38.
4. Williums JG, Kubelik AR, Kenneth JL, Rafalski JA, Scott V.T. DNA polymorphism amplified by arbitrary primers are useful as genetic
markers. Nucleic Acids Res 1990;18:6531-5.
5. Thormann CE, Ferreira ME, Camargo LEA, Tivang JG, Osborn TC.Comparison of RFLP and RAPD markers to estimate genetic
relationships within and among cruciferous species. Theor Appl Genet 1994;88:973-80.
6. Vos P, Hogers R, Bleeker M, Reijans M, Lee TV, Hornes A, et al. AFLP: A new technique for DNA fingerprinting. Nucl Acids Res
1995;23:4407-14.
7. Zietkiewicz E, Rafalski A, Labuda D. Genome fingerprinting by inter simple sequence repeat (ISSR)-anchored polymerase chain reaction
amplification. Genomics 1994;20:176-83.
8. Bornet B, Branchard M. Nonanchored inter simple sequence repeat (ISSR) marker: reproducible and specific tools for genome fingerprinting.
Plant Mol Biol Rep 2001;19:209-15.
9. Archak S, Gaikwad AB, Gautam D, Rao EVVB, Swamy KRM, Karihalo JL. Comparative assessment of DNA fingerprinting techniques (RAPD,
ISSR and AFLP) for genetic analysis of cashew (Anacardium occidentaleL.) accessions of India. Genome 2003;46:362-69.
10. Qin LH, Tan Q, Chen MJ, Pan YJ. Use of inter- simple sequence repeats markers to develop strain-specific SCAR markers for Lentinula
edodes. FEMS Microbiol Lett 2006;257:112-16.
11. Su H, Lei W, Yihe G, Ermei. F, Jie S, Linde L. Development of strainspecific SCAR markers for authentication of Ganoderma lucidum. World
J Microbiol Biotechnol 2008;24:1223-26.
12. Doyle JJ, Doyle JL. A rapid DNA isolation procedure for small qualities of fresh leaf tissue. Phytochem Bull 1987;19:11-15.
13. Sneath PHA, Sokal RR. Numerical Taxomomy, editors. San Francisco: Freeman; 1973.
14. Rohlf FJ. NTSYS-pc. Numerical Taxonomy and Multivariate Analysis System. Version 2.01. Applied Biostatics, Inc. Department of Ecology
and Evolution. State University of New York; 1998.
15. กษมา สุขาภิรมย์, นพมาศ สุนทรเจริญนนท์, เย็นจิตร เตชะดำรงสิน, โกวิท พัฒนาปัญญาสัตย์. ฤทธิ์ทางยาของเห็ดหลินจือ. วารสารการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ทางเลือก ๒๕๕๑;๖:๓๒๒-๒๙.
16. Akagi H, Yokozeki Y, Imagaki A, Nkamura A,Fujimura T. A co-dominant DNA marker closely linked to the rice nuclear restorer gene, RF-1
identified with inter -SSR fingerprinting. Genome 1996;39:1205-09.
17. Chin E, Senior M, Shu LH, Smith J.C. Maize simple repetitive DNA sequences: Abundance and allele variation. Genome 1996;39:866-73.
18. Yu K, Park S, Poysa V. Abundance and variation of micro satellite DNA sequence in beans (Phaseolus and Vigna). Genome 1999;42:27-34.