การวิเคราะห์ปริมาณ Eurycomanone ในรากปลาไหลเผือก ด้วยวิธี High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
Article Sidebar
Main Article Content
บทคัดย่อ
Eurycomanone เป็นสารกลุ่ม quassinoids พบได้ในสมุนไพรรากปลาไหลเผือก (Eurycoma longifolia Jack
วงศ์ Simaroubaceae) มีฤทธิ์ทางชีวภาพ เช่น ลดไข้ รักษามาลาเรีย กระตุ้นความรู้สึกทางเพศของหนูตัวผู้ ซึ่งในประเทศไทยยังไม่มีวิธีควบคุมปริมาณสาร eurycomanone ในสมุนไพรชนิดนี้ การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาวิธีวิเคราะห์ปริมาณ eurycomanone ในรากปลาไหลเผือกด้วยวิธี High Performance Liquid Chromatography (HPLC) ซึ่งสามารถสรุปวิธีวิเคราะห์โดยสกัดตัวอย่างรากปลาไหลเผือก 2 กรัม โดยการ reflux ด้วย methanol ปริมาตร 50 มิลลิลิตร เป็นเวลา 1 ชั่วโมง กรองและนำสารสกัดที่ได้มาระเหยจนแห้ง จากนั้นละลายกลับและปรับปริมาตรด้วย 50% methanol จนครบ 10 มิลลิลิตร นำสารละลายดังกล่าว ปริมาตร 20 ไมโครลิตร มาวิเคราะห์ด้วยเครื่อง HPLC โดยใช้คอลัมน์ Atlantis® T3, C18, 4.6x150 มิลลิเมตร, 3 ไมโครเมตร และใช้ solvent A คือน้ำกลั่น และ solvent B คือ acetonitrile ต่อ methanol อัตราส่วน 1:1 เป็น mobile phase อัตราการไหล 1.5 มิลลิลิตร/นาที และตรวจวัดด้วย PDA ที่ความยาวคลื่น 243 นาโนเมตร ผลการทดสอบความใช้ได้ของวิธีวิเคราะห์ดังกล่าว พบว่า calibration curve มีความเป็นเส้นตรงในช่วงความเข้มข้น 0.06–0.36 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร มีค่า coefficient (R2) เท่ากับ 0.9995 ค่า % recovery อยู่ในช่วง 96–105% ค่า HORRAT เท่ากับ 1.66–1.96 ค่า LOD และ LOQ มีค่าเท่ากับ 0.0106 และ 0.0354 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร ตามลำดับ ซึ่งวิธีวิเคราะห์ที่พัฒนาขึ้นนี้มีความเหมาะสม และสามารถนำไปใช้เป็นวิธีตรวจวิเคราะห์ปริมาณ eurycomanone ในรากปลาไหลเผือก และสามารถนำไปสู่การกำหนดเกณฑ์ปริมาณสารสำคัญในรากปลาไหลเผือกต่อไป
Article Details
เอกสารอ้างอิง
2. Boonyaprapat N, Chokchaicharoenporn O. Medicinal plants indigenous to Thailand. Bangkok: Prachachon Co Ltd; 2000. p.175-6. (in Thai)
3. Supcharoen P, Rueng-rangsri N, Deewisej K. Herbal plants in national parks in central Thailand. 2nd ed. Nonthaburi: Thai Traditional Medicine Development Foundation; 2006. 108 p. (in Thai)
4. National List of Essential Medicines (No. 2) B.E. 2554 (2011). Published in Government Gazette on 28 June B.E. 2554 (2011). (in Thai)
5. Yusuf H, Mustofa M, Wijayanti A, Susidarti RA, Asih PBS, Suryawati, et al. A new quassinoid of four isolated compounds from extracts Eurycoma longifolia Jack roots and their in-vitro antimalarial activity. International Journal of Research in Pharmaceutical and Biomedical Sciences. 2013;4(3):728-34.
6. Ang HH, Hitosuyanagi Y, Fukaya H, Takeya K. Quassinoids from Eurycoma longifolia. Phytochemistry. 2002;59(8):833–7.
7. Kardono LB, Angerhofer CK, Tsauri S, Padmawinata K, Pezzuto JM, Kinghorn AD. Cytotoxic and antimalarial constituents of the root of Eurycoma longifolia. J Nat Prod. 1991;54(5):1360–7.
8. Low BS, Teh CH, Yuen KH, Chan KL. Physico–chemical effects of the major quassinoids in a standardized Eurycoma longifolia extract (Fr 2) on the bioavailability and pharmacokinetic properties, and their implications for oral antimalarial activity. Nat Prod Commun. 2011;6(3):337–41.
9. Hajjouli S, Chateauvieux S, Teiten MH, Orlikova B, Schumacher M, Dicato M, et. al. Eurycomanone and eurycomanol from Eurycoma longifolia Jack as regulators of signaling pathways involved in proliferation, cell death and inflammation. Molecules. 2014;19(9):14649–66.
10. Chan KL, Choo CY, Abdullah NR, Ismail Z. Antiplasmodial studies of Eurycoma longifolia Jack using the lactate dehydrogenase assay of Plasmodium falciparum. J Ethnopharmacol. 2004;92(2–3):223–7.
11. Low BS, Das PK, Chan KL. Standardized quassinoids-rich Eurycoma longifolia extract improved spermatogenesis and fertility in male rats via the hypothalamic–pituitary–gonadal axis. J Ethnopharmacol. 2013;145(3):706–14.
12. Purwantiningsih A, Ismail S, Hussin AH, and Chan KL. Inhibitory effect of Eurycoma longifolia extract and eurycomanone on human cytochrome P450 isoforms. International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 2014;(6):441-5.
13. Pan Y, Tiong KH, Abd-Rashid BA, Ismail Z, Ismail R, Mak JW, et. al. Effect of eurycomanone on cytochrome P450 isoforms CYP1A2, CYP2A6, CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19, CYP2E1 and CYP3A4 in vitro. J Nat Med. 2014;68(2):402–6.
14. Zaini NN, Osman R, Juahir H, Saim N. Development of chromatographic fingerprints of Eurycoma longifolia (Tongkat ali) roots using online solid phase extraction–liquid chromatography (SPE-LC). Molecules. 2016;21(5):1–10.
15. Norhidayah A, Vejayan J, Yusoff M. Detection and quantification of eurycomanone levels in tongkat ali herbal products. Journal of Applied Sciences. 2015;15(7):999-1005.
16. Khari N, Aisha AFA, Ismai Z. Reverse phase high performance liquid chromatography for the quantification of eurycomanone in Eurycoma longifolia Jack (Simaroubaceae) extracts and their commercial products. Tropical Journal of Pharmaceutical Research. 2014;13(5):801–7.
17. Ling SK, Salbiah M, Fauziah A, Mohamad LN. Study of Eurycoma longifolia by FT-IR and 2D–IR correlation spectroscopy. Forest Research Institute Malaysia. Proceedings of the Seminar on Medicinal and Aromatic Plants (MAPS2008). Malaysia: 2009. p. 258-67.
18. Department of Medical Sciences. Thai herbal compendium on physico-chemical specification volume I. Nonthaburi: Department of Medical Sciences; 2016. p. 17–9. (in Thai)
19. Department of Medical Sciences. A practical guide for single laboratory method validation of chemical methods. Nonthaburi: Department of Medical Sciences; 2006. (in Thai)
20. Department of Standards Malaysia. Phytopharmaceutical aspects of freeze dried water extract from tongkat ali roots – specification. Malaysia: Malaysian standard; 2011. 12 p.
