การตรวจหาการสร้างไบโอฟิล์มของเชื้อซัลโมเนลลา โดยวิธี Crystal violet microtiter plate assay
Main Article Content
บทคัดย่อ
ซัลโมเนลลาเป็นเชื้อก่อโรคที่ติดต่อทางอาหารที่สำคัญชนิดหนึ่ง ปัจจัยที่ก่อให้เกิดความรุนแรงของโรคปัจจัยหนึ่งคือความสามารถในการสร้างไบโอฟิล์มของเชื้อ เนื่องจากไบโอฟิล์มจะทำให้เชื้อเกิดการดื้อต่อยาปฏิชีวนะและทำให้ระบบภูมิคุ้มกันของร่างกายทำลายเชื้อที่สร้างไบโอฟิล์มได้ยากขึ้น การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อตรวจหาการสร้างไบโอฟิล์มของเชื้อซัลโมเนลลาทั้งหมด 100 ไอโซเลท ที่แยกได้จากเนื้อไก่สด จำนวน 50 ตัวอย่าง จากตลาดสด 10 แห่งในฝั่งธนบุรี กรุงเทพมหานคร โดยการตรวจหาและวินิจฉัยเชื้อซัลโมเนลลาในเนื้อไก่สดตามวิธีมาตรฐานด้วยการทดสอบทางชีวเคมีและน้ำเหลืองวิทยา และตรวจหาการสร้างไบโอฟิล์มของเชื้อด้วยวิธี Crystal violet microtiter plate assay วิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้สถิติเชิงพรรณนา ผลการศึกษาพบว่า เชื้อซัลโมเนลลาที่แยกได้จากเนื้อไก่สด จำนวน 100 ไอโซเลทนั้น พบเป็นเชื้อซัลโมเนลลา Serogroup A ร้อยละ 11, Serogroup B ร้อยละ 23, Serogroup C ร้อยละ 41, Serogroup D ร้อยละ 6, Serogroup E ร้อยละ 19 และพบการสร้างไบโอฟิล์ม จำนวน 83 ไอโซเลท (ร้อยละ 83) โดยมีความสามารถในการสร้างไบโอฟิล์มในระดับสูง ระดับปานกลาง และระดับต่ำ ร้อยละ 24, 33 และ 26 ตามลำดับ ทั้งนี้พบว่าเชื้อซัลโมเนลลา Serogroup D มีการสร้างไบโอฟิล์มทุกไอโซเลท จากการตรวจพบการสร้างไบโอฟิล์มของเชื้อมีความชุกสูงนั้นส่งผลให้ผู้บริโภคอาจมีความเสี่ยงต่อสุขภาพหากได้รับเชื้อดังกล่าวเข้าสู่ร่างกาย และอาจส่งผลให้เกิดปัญหาในการรักษาเนื่องจากเชื้ออาจดื้อต่อยาปฏิชีวนะที่ใช้ในการรักษาการติดเชื้อดังกล่าวได้
Article Details
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
Journal of Safety and Health is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International (CC BY-NC-ND 4.0) licence, unless otherwise stated.
References
กระทรวงสาธารณสุข, กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์. (2554). วิธีมาตรฐานสำหรับการวิเคราะห์อาหาร เล่มที่ 1. สำนักงานพระพุทธศาสนาแห่งชาติ.
จีระเดช มาลา. (2551). การเกิดและการควบคุมไบโอฟิล์มของ Salmonella บนพื้นผิวเหล็กสแตนเลส [วิทยานิพนธ์ปริญญามหาบัณฑิต, จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย]. สำนักการวิจัยแห่งชาติ. https://dric.nrct.go.th/Search/SearchDetail/225350
ภัทรชัย กีรติสิน. (2552). ตำราวิทยาแบคทีเรียการแพทย์ (พิมพ์ครั้งที่ 2). คณะแพทยศาสตร์ศิริราชพยาบาลมหาวิทยาลัยมหิดล.
Abee, T., Kovacs, A. T., Kuipers, O. P., & van der Veen, S. (2011). Biofilm formation and dispersal in Gram-positive bacteria. Current Opinion in Biotechnology, 22(2), 172-179. https://doi.org/10.1016/j.copbio.2010.10.016
Agarwal, R. K., Singh, S., Bhilegaonkar, K. N., & Singh, V. P. (2011). Optimization of microtitre plate assay for the testing of biofilm formation ability in different Salmonella serotypes. International Food Research Journal, 18(4), 1493-1498.
Antunes, P., Mourao, J., Campos, J., & Peixe, L. (2016). Salmonellosis: the role of poultry meat. Clinical Microbiology and Infection, 22(2), 110-121. https://doi.org/10.1016/j.cmi.2015.12.004
Arciola, C. R., Campoccia, D., Speziale, P., Montanaro, L., & Costerton, J. W. (2012). Biofilm formation in Staphylococcus implant infections. A review of molecular mechanisms and implications for biofilm-resistant materials. Biomaterials, 33(26), 5967–5982. https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2012.05.031
Black, C. E., & Costerton, J. W. (2010). Current Concepts Regarding the Effect of Wound Microbial Ecology and Biofilms on Wound Healing. Surgical Clinics of North America, 90(6), 1147–1160. https://doi.org/10.1016/j.suc.2010.08.009
Chakraborty, S., Roychoudhury, P., Samanta, I., Subudhi, P. K., Lalhruaipuii, L., Das, M., De, A., Bandyopadhayay, S., Joardar, S. N., Mandal, M., Qureshi, A., & Dutta, T. K. (2020). Molecular detection of biofilm, virulence and antimicrobial resistance associated genes of Salmonella serovars isolated from pig and chicken of Mizoram, India. Indian Journal of Animal Research, 54(5), 608-613. https://doi.org/10.18805/ijar.b-3817
Cwiek, K., Korzekwa, K., Tabis, A., Bania, J., Bugla-Płoskonska, G., & Wieliczko, A. (2020). Antimicrobial Resistance and Biofilm Formation Capacity of Salmonella enterica Serovar Enteritidis Strains Isolated from Poultry and Humans in Poland. Pathogens, 9(8), 643. https://doi.org/10.3390/pathogens9080643
Donado-Godoy, P., Clavijo, V., Leon, M., Tafur, M. A., Gonzales, S., Hume, M., Alali, W., Walls, I., Lo Fo Wong, D. M. A., & Doyle, M. P. (2012). Prevalence of Salmonella on Retail Broiler Chicken Meat Carcasses in Colombia. Journal of Food Protection, 75(6), 1134–1138. https://doi.org/10.4315/0362-028x.jfp-11-513
Donlan, R. M. (2002). Biofilms: Microbial Life on Surfaces. Emerging Infectious Diseases, 8(9), 881–890. https://doi.org/10.3201/eid0809.020063
Hall-Stoodley, L., Costerton, J. W., & Stoodley, P. (2004). Bacterial biofilms: from the Natural environment to infectious diseases. Nature Reviews Microbiology, 2(2), 95–108. https://doi.org/10.1038/nrmicro821
Hayrapetyan, H., Muller, L., Tempelaars, M., Abee, T., & Nierop Groot, M. (2015). Comparative analysis of biofilm formation by Bacillus cereus reference strains and undomesticated food isolates and the effect of free iron. International Journal of Food Microbiology, 200, 72–79. https://doi.org/10.1016/j.ijfoodmicro.2015.02.005
Jarquin, C., Alvarez, D., Morales, O., Morales, A. J., Lopez, B., Donado, P., Valencia, M. F., Arevalo, A., Munoz, F., Walls, I., Doyle, M. P., & Alali, W. Q. (2015). Salmonella on Raw Poultry in Retail Markets in Guatemala: Levels, Antibiotic Susceptibility, and Serovar Distribution. Journal of Food Protection, 78(9), 1642–1650. https://doi.org/10.4315/0362-028x.jfp-15-117
Kline, T., Bowman, J., Iglewski, B. H., de Kievit, T., Kakai, Y., & Passador, L. (1999). Novel synthetic analogs of the Pseudomonas autoinducer. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 9(24), 3447–3452. https://doi.org/10.1016/s0960-894x(99)00626-5
Pompermayer, D. M. C., & Gaylarde, C. C. (2000). The influence of temperature on the adhesion of mixed cultures of Staphylococcus aureus and Escherichia coli to polypropylene. Food Microbiology, 17(4), 361-365. https://doi.org/10.1006/fmic.1999.0291
Rachid, S., Ohlsen, K., Witte, W., Hacker, J., & Ziebuhr, W. (2000). Effect of Subinhibitory Antibiotic Concentrations on Polysaccharide Intercellular Adhesin Expression in Biofilm-Forming Staphylococcus epidermidis. Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 44(12), 3357–3363. https://doi.org/10.1128/aac.44.12.3357-3363.2000
Sereno, M., Ziech, R., Druziani, J., Pereira, J., & Bersot, L. (2017). Antimicrobial Susceptibility and Biofilm Production by Salmonella sp. Strains Isolated from Frozen Poultry Carcasses. Revista Brasileira de Ciencia Avicola, 19(1), 103–108. https://doi.org/10.1590/1806-9061-2016-0268
Shukla, S. K., & Rao, T. S. (2017, January 13). An Improved Crystal Violet Assay for Biofilm Quantification in 96-Well Microtitre Plate. Cold Apring Harbor Laboratory, https://doi.org/10.1101/100214.
Singh, P. R., Bajaj, H., Benz, R., Winterhalter, M., & Mahendran, K. R. (2015). Transport across the outer membrane porin of mycolic acid containing actinomycetales: Nocardia farcinica. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Biomembranes, 1848(2), 654–661. https://doi.org/10.1016/j.bbamem.2014.11.020
Steenackers, H., Hermans, K., Vanderleyden, J., & De Keersmaecker, S. C. J. (2012). Salmonella biofilms: An overview on occurrence, structure, regulation and eradication. Food Research International, 45(2), 502–531. https://doi.org/10.1016/j.foodres.2011.01.038
Trampari, E., Holden, E. R., Wickham, G. J., Ravi, A., Martins, L. de O., Savva, G. M., & Webber, M. A. (2021). Exposure of Salmonella biofilms to antibiotic concentrations rapidly selects resistance with collateral tradeoffs. Npj Biofilms and Microbiomes, 7(1). https://doi.org/10.1038/s41522-020-00178-0
von Eiff, C., Jansen, B., Kohnen, W., & Becker, K. (2005). Infections associated with medical devices: pathogenesis, management and prophylaxis. Drugs, 65(2), 179–214. https://doi.org/10.2165/00003495-200565020-00003
Wang, H., Sodagari, M., Chen, Y., He, X., Newby, B. Z., & Ju, L. K. (2011). Initial bacterial attachment in slow flowing systems: Effects of cell and substrate surface properties. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 87(2), 415–422. https://doi.org/10.1016/j.colsurfb.2011.05.053
Wang, H., Sodagari, M., Ju, L. K., & Newby, B. Z. (2013). Effects of shear on initial bacterial attachment in slow flowing systems. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 109, 32–39. https://doi.org/10.1016/j.colsurfb.2013.03.016
Watnick, P., & Kolter, R. (2000). Biofilm, City of Microbes. Journal of Bacteriology, 182(10), 2675–2679. https://doi.org/10.1128/jb.182.10.2675-2679.2000