The Study of Cell Line Preparation Techniques for Scanning Electron Microscope Using Hexamethyldisilazane (HMDS)
DOI:
https://doi.org/10.14456/jmu.2025.20Keywords:
Drying, Cell line, Scanning Electron Microscope, HexamethyldisilazaneAbstract
Scientific Instruments Centre, Faculty of Science, King Mongkut's Institute of Technology Ladkrabang have a laboratory for culturing animal cells. This laboratory provides services for cultivating cell lines on various materials, and many users need to study the physical characteristics of cell lines using scanning electron microscopy. Therefore, a study was conducted on preparing the African green monkey kidney fibroblast (Vero) and Human oral cavity carcinoma cell lines (KB). The samples were dried using 50, 70, and 100% concentrations of hexamethyldisilazane (HMDS) at 3, 5, and 10 minutes. Count the number of individual and aggregated cells that appeared well-shaped with minimal occurrence of flattened cells.
The results found that 100% concentration of HMDS at 3 minutes was the best condition for drying step. Vero and KB cell lines had 84.73 and 92.45% intact physical characteristics, respectively. Compared with Critical Point Drying (CPD) method, the best physical characterization of Vero and KB cell lines has 85.23 and 92.38%, respectively, which was not significantly different at the 95% confidence level.
This concludes that drying step of HMDS has equal quality to CPD. The method also proved useful for drying Vero and KB cell lines for SEM imaging.
References
Ali, R., El-Boubbou, K. & Boudjelal, M. (2021). An easy, fast and inexpensive method of preparing a biological specimen for scanning electron microscopy (SEM). MethodsX, 8, 1-8. https://doi.org/10.1016/j.mex.2021.101521
Bianca, P. S., Fernanda, N., Camila, P. F., Ricardo, M. S., Adriana, F. S., Flavio, F. D., Neftali, L. V. C. (2015). Comparing different methods to fix and to dehydrate cells on alginate hydrogel scaffolds using scanning electron microscopy. Microscopy Research and Technique, 78(7), 553-561. https://doi.org/10.1002/jemt.22508
Breat, F., Zanger, R. & Wisse, E. (1997). Drying cells for SEM, AFM and TEM by Hexamethyldisilazane: a study on hepatic endothelial cells. Journal of Microscopy, 168(1), 84-87.
Hazrin-Chong, N. H., & Manefield, M. (2012). Corrigendum to An alternative SEM drying method using hexamethyldisilazane (HMDS) for microbial cell attachment studies on sub-bituminous coal. Journal of Microbiological Methods, 90(2), 96-99. https://doi.org/10.1016/j.mimet.2012.04.014
Jusman, Y., Ng, S. C., & Osman, N. A. A., (2014). Investigation of CPD and HMDS Sample Preparation Techniques for Cervical Cells in Developing Computer-Aided Screening System Based on FE-SEM/EDX. The Scientific World Journal, 13(1), 124-135.
Lee, J., T., Y. & Chow, K. L. (2012). SEM Sample Preparation for Cells on 3D Scaffolds by Freeze-Drying and HMDS. Wiley Online Library, 34(1), 12-25. https://doi.org/10.1002/sca.20271
Nikara, S., Ahmadi, E. & Nia, A., A. (2020). Effects of different preparation techniques on the microstructural features of biological materials for scanning electron microscopy. Journal of Agriculture and Food Research, 2, 361-368.
Downloads
Published
Issue
Section
License
Copyright (c) 2025 Mahidol R2R e-Journal
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
ข้อความลิขสิทธิ์ (Copyright text)
บทความที่ได้รับการตีพิมพ์เป็นลิขสิทธิ์ของวารสาร Mahidol R2R e-Journal กองทรัพยากรบุคคล มหาวิทยาลัยมหิดล อนุญาตให้นำข้อความ เนื้อหา รูปภาพ ไปพิมพ์เผยแพร่ได้ แต่ห้ามนำไปใช้ประโยชน์ในเชิงพาณิชย์ หรือมีเจตนาเอื้อผลประโยชน์ในทางธุรกิจใดๆ
ข้อความที่ปรากฏในบทความแต่ละเรื่องในวารสารวิชาการเล่มนี้เป็นความคิดเห็นส่วนตัวของผู้เขียนแต่ละท่าน ความรับผิดชอบ องค์ประกอบทั้งหมดของบทความแต่ละเรื่องเป็นของผู้เขียนแต่ละท่าน หากมีความผิดพลาดใด ๆ ผู้เขียนแต่ละท่านจะรับผิดชอบบทความของตนเองแต่ผู้เดียว
ผลประโยชน์ทับซ้อน (Conflicts of Interest)
ผู้ประพันธ์ต้องเปิดเผยเป็นลายลักษณ์อักษร (ระบุในรายงาน)ถึงทุกปัจจัยรวมทั้งปัจจัยด้านการเงินที่อาจมีอิทธิผลต่อ การศึกษาผลการศึกษาหรือข้อสรุปจากรายงานการศึกษาวิจัย และจำเป็นต้องระบุหากได้รับการสนับสนุนทางการเงินจาก แหล่งทุนภายนอกเพื่อให้สอดคล้องกับคำประกาศของบรรณาธิการ ผู้ร่วมประพันธ์ทุกท่านต้องมีส่วนร่วมในผลงานการศึกษาวิจัย และควรมีการระบุไว้อย่างชัดเจนในหนังสือปะหน้าประกอบการส่งเรื่องที่จะตีพิมพ์ รวมทั้งระบุไว้ในส่วนของกิตติกรรมประกาศ (acknowledgements) ในตอนท้ายของรายงานต้นฉบับ
