Uncertainty of Total Bacterial Count in Food by the Pour Plate Technique of the Microbiological Laboratory, Regional Medical Sciences Centre 10, Ubonratchathani

Main Article Content

Wiphawadi Rakkaen
Suchittra Saentaweesuk
Sudarat Kaewmanee
Suttipong Saengchot


Background: Total Bacterial Count Analysis is a standard criterion to indicate food spoilage. If the amount of Total Bacterial Count is high, it causes many diseases especially in the children who get low immunities; such as, stomachache, nauseous, vomit, and fever. The Ministry of Public Health that is specified in many types of food. The microbiological laboratory Medical Sciences Center 10, Ubon Ratchathani analyzed samples using the BAM Online. Chapter 3. 2001 with Pour plate technique. The standard required laboratories to evaluate measurement uncertainty to show the accuracy from ISO 19036:2009 standards. The standard required laboratories to evaluate measurement uncertainty to show only deviation standard of reproduction. Since the standard ISO 19036:2019 in the new version required Pour plate technique, it obtained to calculate the 3 uncertainty components; Technical uncertainty, Matrix uncertainty, and Distribution uncertainty. Thus, the microbiological laboratory Medical Sciences Center 10, Ubon Ratchathani had to indicate the uncertainty concerning with the standard in the present time.


Objectives: This research was aimed to evaluate the results of Intralaboratory reproducibility standard deviation (SIR), and to calculate the expanded uncertainty analysis’s result

Methods: This experimental research was in The microbiological laboratory Medical Sciences Center 10, Ubon Ratchathani during August-October, 2020. There were 4 analyzers in the laboratory analyzed of total bacteria count in food with 10 different samples by using the BAM Online (2001) Chapter 3 standard method. The samples were Vietnamese noodles, milk, prickled fish, sauces, ingredient powder, ice-cream, sausages, Isan pricked pork, sushi, and others with lyophilize sample. Then, the results were calculated from Standard deviation, SIR or Technical Uncertainty (Utech) referred to uncertainty of procedure analysis in the microbiology laboratories; Matrix Uncertainty (umatrix) referred to uncertainty of the samples’ characteristics and bacteria’s spreading in the samples; and Distributional Uncertainty (upoisson) referred to uncertainty of total colonies counting analysis to the results’ report.

Results:  Based on the analysis of total bacteria count in 10 different food samples from 4 analyzers and covered in normal, routine and naturally contaminated samples that the estimated results were not different in statistical significance (p-value) = 0.9989. The standard deviation of reproducibility (SIR) value was 0.0946. This was used to calculate the expanded uncertainty for the report on the total bacterial counts in food  to show the extent of the error of the results at the 95% confidence level.

Conclusions: The results of uncertainty estimation from intralaboratory reproducibility standard deviation (SIR) appropriated to find the results of the uncertainty of the total bacterial count in the sampling food. However, the laboratory should experiment the other kinds of food to test or aware in SIR value which should not higher than the laboratory’s limitation with 0.1 value. If higher, the laboratory should analyze other factors, and improve in the case of changing the analyzers with the new up-to-date SIR value.

Article Details

How to Cite
Rakkaen W, Saentaweesuk S, Kaewmanee S, Saengchot S. Uncertainty of Total Bacterial Count in Food by the Pour Plate Technique of the Microbiological Laboratory, Regional Medical Sciences Centre 10, Ubonratchathani. TFDJ [Internet]. 2023 Aug. 3 [cited 2024 Apr. 19];30(2):83-97. Available from: https://he01.tci-thaijo.org/index.php/fdajournal/article/view/265180
Research Article
Author Biography

Wiphawadi Rakkaen, Regional Medical Sciences Center 10, Ubonratchathani

Regional Medical Sciences Center 10, Ubonratchathani, 82 KlungArwut Road, Tambon Khamyai, Muaeng, Ubonratchathani, 34000, Thailand


ศูนย์เครือข่ายข้อมูลอาหาร. การเสื่อมเสียของอาหารเนื่องจากจุลินทรีย์ [อินเทอร์เน็ต]. 2563 [เข้าถึงเมื่อ 15 พ.ย. 2565]. เข้าถึงได้จาก: https://www.foodnetworksolution.com/wiki/word/1856/การเสื่อมเสียของอาหารเนื่องจากจุลินทรีย์-microbial-spoilage

กระทรวงสาธารณสุข. ประกาศกระทรวงสาธารณสุข (ฉบับที่ 350) พ.ศ. 2556 เรื่อง นมโค. ราชกิจจานุเบกษา ฉบับประกาศทั่วไปเล่มที่ 130, ตอนพิเศษ 87 ง (ลงวันที่ 24 กรกฎาคม 2556).

กระทรวงสาธารณสุข. ประกาศกระทรวงสาธารณสุข (ฉบับที่ 210) พ.ศ. 2543 เรื่อง อาหารกึ่งสำเร็จรูป. ราชกิจจานุเบกษา ฉบับประกาศทั่วไปเล่มที่ 118, ตอนพิเศษ 6 ง (ลงวันที่ 24 มกราคม 2544).

ISO/ IEC 17025: 2017 General Requirement for the Competence of Testing and Calibration Laboratories. 2017(E); 2017.

U.S. Food and Drug. Bacteriological Analytical Manual. Chapter 3. Aerobic plate count; 2017 [cited 2017 Jan 14]. Available from: https://www.fda.gov/food/laboratory-methods-food/bam-chapter-3-aerobic-plate-count

รวิวรรณ อาจสำอาง. ความแตกต่างของการหาความไม่แน่นอน ของการทดสอบทางเคมีและจุลชีววิทยา.วารสารสำนักบริหารและรับรองห้องปฏิบัติการ (บร.) 2552;6(16-17):5-7.

ISO/IEC GUIDE 98-3:2008 Uncertainty of measurement Part 3: Guide to the expression of uncertainty in measurement (GUM:1995); 2008 [cited 2022 Jul 3]. Available from:


ISO 19036: 2019 (E). Microbiological of Food and Animal Feeding Stuffs - Guidelines for the Estimation of Measurement Uncertainty for Quantitative Determinations; 2019

ISO 7218:2007/AMD.1:2013(E). Microbiological of food and animal feeding Stuffs – General Requirements and guidance for microbiological examinations [Internet].2020 [cited 2020 Aug 31]. Available from: https://masm.gov.mn/masmj/wp-content/uploads/2019/09/ISO_7218_2007_Amd_1_201328E29-Character_PDF_document.pdf

กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์. แนวทางการใช้กฎการตัดสินผลการทดสอบ/สอบเทียบและการรายงานความสอดคล้องกับเกณฑ์ของผลิตภัณฑ์; 2564.

พรทิพย์ ศรีศร, มุทิตา คณฑา, จำรัส พูลเกื้อ. การศึกษาเพื่อพัฒนาความสามารถของห้องปฏิบัติการสำหรับการประมาณค่าความไม่แน่นอนของการนับปริมาณจุลินทรีย์ทั้งหมดในตัวอย่างผลิตภัณฑ์น้ำพริกพร้อมบริโภค และขนม. วารสารอาหารและยา 2557;21(1):49-58.

Yunxia, W. and et al. Evaluation of Uncertainty of Detection Results of Aerobic Plate Count. Asian Agricultural Research [Internet]. 2021 [cited 2022 Jul 3]; 13(6): 59-63. Available from: https://ageconsearch.umn.edu/record/316960

กิจติศักดิ์ ยศอินทร์. การศึกษาผลกระทบของเนื้อสารตัวอย่างและประเภทของแบคทีเรียที่มีผลต่อค่าความไม่แน่นอนของการทดสอบทางจุลชีววิทยา. วารสารวิทยาศาสตร์ประยุกต์ กรมวิทยาศาสตร์บริการ 2556;2(2):77-83.