A2 TEST : วิธีวัดสัดส่วนของปริมาณ Hb A2 อย่างง่าย เพื่อใช้ในการค้นหา Beta-thalassemia trait

ผู้แต่ง

  • ต่อพงศ์ สงวนเสริมศรี ภาควิชากุมารเวชศาสตร์ คณะแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัยเชียงใหม่
  • ประนุช ตันไพบูลย์ ภาควิชากุมารเวชศาสตร์ คณะแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัยเชียงใหม่
  • แสงเดือน วงษ์เมตตา ศูนย์ส่งเสริมสุขภาพเขต 10 จังหวัดเชียงใหม่
  • สุรสิทธิ์ ชมชื่น ภาควิชากุมารเวชศาสตร์ คณะแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัยเชียงใหม่
  • ทัศนียา จำรัสรัตนกร ภาควิชากุมารเวชศาสตร์ คณะแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัยเชียงใหม่

คำสำคัญ:

Hb A2, Screening method, B-thalassemia trait

บทคัดย่อ

ความเป็นมา Hb A2 พบในคนปกติราว 3% สัดส่วนส่วนดังกล่าวจะสูงขึ้นในผู้ที่เป็น B-thalassemia trait และสูงขึ้นมากใน B-thalassemia trait แต่ในประเทศไทย B-globin gene mutation ซึ่งเป็นสาเหตุของ B-thalassemia trait มีมากกกว่า 30 ชนิด และมีเพียงไม่กี่ชนิดเท่านั้นที่จำเป็นต้องทราบสัดส่วนที่แน่นอนตลอดจนต้องมีวิธีการวัดค่าของ Hb A2 ที่เหมาะสม เพื่อให้สามารถให้บริการในการควบคุมและป้องกันการเกิดโรคธาลัสซีเมียชนิดร้ายแรงได้ วิธีการ A2 test เป็นวิธีที่พัฒนามาจากวิธีmicrocolumn DEAE sephadex A50 chromatography แต่ใช้ disposable syringe ขนาด 3.5 มล. เป็น column และ syringe disposable ขนาด 10  มล. เป็น reservior ได้นำวิธี A2 test ไปตราจหาค่า CV และค่า correlation coefficient เทียบกับวิธี automated HPLC และ automated LPLC และนำไปศึกษาตัวอย่างเลือดชนิดต่างๆ เพื่อหาค่า HB A2 ในคนปกติ และ ผู้ที่เป็น B-thalassemia trait ผลการศึกษา  ค่า CV ของวิธี A2 test อยู่ที่ระดับ 7.9% ขณะที่ของ automated HPLC และ LPLC เท่ากับ 1.8 และ 2.4% ตามลำดับ ค่า correlation coefficient ของวิธี A2 test กับวิธี automated HPLC เมื่อนำไปวัดหาค่า Hb A2 จากจำนวนหญิงฝากครรภ์ 300 ราย (r) เท่ากับ 0:99 และ A2 test เทียบกับวิธี automated LPLCเมื่อนำไปวัดค่า Hb A2 ในอาสาสมัคร 149 ราย ให้ค่า r= 0.99 A2 test กับค่า Hb A2 ใน B-thalassemia trait 74 ราย ให้ค่า Hb A2 เฉลียเท่ากับ 6.08+-0.76% มีค่าต่ำสุดเท่ากับ 4.3% และสูงสุดเท่ากับ 7.5% A2 test กับเลือดตัวอย่าง 449 ราย แบ่งได้เป็น 3 กลุ่ม คือ กลุ่มที่ไม่ใช่ B-thalassemia trait มี 385 ราย มีค่า Hb A2 เฉลี่ยเท่ากับ 2,92+-0.4% โดยมีค่าอยู่ระหว่าง 1.7-3.7% กลุ่มที่ 2 เป็นB-thalassemia trait มี 22 ราย มีค่าเฉลียเท่ากับ 5.4+-0.6% มีค่าอยู่ระหว่าง 4.5-6.7% และกลุ่มที่ 3 มีค่า Hb A2 มาก 10% ขึ้นไป มี 39 รายเป็นพวก Hb E ผลการตรวจกรองของหญิงฝากครรภ์ 6,648 ราย โดยใช้ค่า HฺB 2 ระหว่าง 4.1-8% พบคู่เสี่ยง 21 คู่ และผลการวินิจฉัยก่อนคลอดจากคู่เสี่ยงพบฟีตัส 5 ราย เป็น homozygous B-thalassemia และ บิดามารดาของฟิตัสทั้ง 5 รายมีค่า Hb A2 อยู่ระหว่าง 5.2-7.3% วิจารณ์และสรุป วิธี A2 test เป็นวิธีวัดหาค่า Hb A2 อย่างง่าย มีค่า CV ต่ำ การตรวจวัดค่า Hb A2 มีผลไปในทิศทางเดียวกับวิธี automated HPLC และ LPLC วิธี A2 test เตรียมได้ในห้องปฏิบัติการทั่วไป การวิเคราะห์แต่ละรายราคาถูก ใน B-thalassemia trait Hb A2 มีค่าอยู่ระหว่าง 4.3-8% ดังนั้น วิธี A2 test น่าจะเป็นอีกวิธีหนึ่งที่สามารถใช้ในโครงการควบคุมและการป้องกันการเกิดโรคธาลัสซีเมียชนิดร้ายแรงสำหรับประเทศได้

Downloads

Download data is not yet available.

เอกสารอ้างอิง

Sanguansermsri T, Steger HF, Sirivatanapa P, et al. Prevention and Control of Severe Thalassemia Syndrome : Chiang Mai Strategy. Thai J Hematol Transf Med 1998;8:207-14.

VARIANTTM Beta-Thalassemia Short Program Instruction Manual. Bio-Rad Diagnostics, Califormia, USA, 1994.

Chamber K, Phillips A, Chapman CS. Use of low pressure liquid chromatography system hemoglobinopathy screening. Clin Lab Haematol 1993;15 119-28

Jenkin MA, Hendy J, Smith ZL. Evaluation of hemoglobin A2 quantitation assay and hemoglobin variant screening by capillary electrophoresis J Capillary Electrophori 1997;4:137-43.

Cotton F, Lin C, Fontiane B, et al. Evaluation of capillary electrophoresis method for routine determination of hemoglobins A and F. Clin Chem 19999;45:237-43.

Mario N, Baudin B, Aussel C, Giboudeau J. Capillary isoelcetric focusing and high performance cation exchange chromatography compared for qualitative and quantitative analysis of hemoglobin variants. Clin Chem 1997;43:2137-42.

Mario N, Baudin B, Giboudeau J. Qualitative and quantitative analysis of hemoglobin variants by capillary isoelectric focusing. J Chromatogr Biomed Sci Appl 1998;706:123-9.

The Hb Gold analyser. HbGold; User Manual. Drew scientific Limited Sowerby Woods Business Park Barrow-in-Furness Cumbria LA144OR United Kingdom. May 1, 1998.

Sanguansermsri T, Phumyu N, Chomchuen S, Steger HE Screening for O.-thalassemia-1 heterozygotes in expecting couples by the combination of a simple erythrocyte osmotic fragility test and a PCR based method. Community Genetics 19999;2:26-9.

Chamrasratanakorn T, Sanguansermsri T, Punyakeaw A. Two minutes Osmotic Fragility Test (2 MIN OF) and Severe Thalassemia Trait Screening. Bull Chiang Mai Assoc Med Sci 1998;31:28-31.

Laig M, Sanguansermsri T, et al. The spectrum of B- thalassemia mutations in northem and northeastern Thailand. Human Genet 1988;84:47-50.

จรัญ จันทลักขณา. ความกระจาย (Distribution). สถิติวิธีวิเคราะห์และวางแผนงานวิจัย. กรุงเทพมหานคร: โรงพ์ไทยวัฒนาพานิช จำกัด 2540:31-9.

Huisman THJ, Jonxis JHP. The Hemoglobinopathies. Techniques of Identification. New York; Basel Marcel Dekker Inc., 1977:105-15.

Toewsini P, Chonuca P, Sanguansemsri T, et al. Simple determination of Hb A for the detection of heterozygous B-thalassemia. Bull Chiang Mai Assoc Med Sci 1977;10:17-24.

Efremov GD. An evaluation of the methods for quantitation of hemoglobin A -results from a survey of 10, 633 cases. Hemoglobin 1977;1:845-60.

Chamrasratanakom T, Sanguansermsni T, Punyakeaw A. A modified microcolumn chromatography for Hb A Determination. Bull Chiang Mai Assoc Med Sci 1998;31:32-5.

ต่อพงศ์ สงวนเสริมศรี, มาริดา พรพัฒน์กุล, ปราณี ฟูเจริญ, สุพรรณ ฟู่เจริญ, ทัศนีย์ เล็บนาค. Quantitation of Hb A2 and Hb E by DEAE-Sephadex Microcolumn Chromatography. ใน: ธาลัสซีเมีย คู่มือการวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการ(ทัศนีย์ เล็บนาค, ปราณี ฟูเจริญ บรรณาธิการ) มูลนิธิโรคโลหิตจางธาลัสซีเมียแห่งประเทศไทย 2540:57-60.

Huisman TH, Schroeder WA, Brodic AN, et al. Microchromatography of hemoglobin II. A simplified procedure for the determination of Hb A . J Lab Clin Med 1975;86:700-2.

Bianco I, Cappabiance MP, Foglietta E, et al. Silent thalassemia : genotypes and phenotypes. Hematologica 1997;82:269-80.

Galanello R, Barella Gasperini D, D, et Genotype of subjects with borderline hemoglobin A level: implication of beta-thalassemia carier screening. Am J Hematol 1994;46:79-81.

Wasi P, Disthasangchan P, Na Nakorn S. The effect of iron deticiency on the levels of Hb A and Hb E. J Lab Clin Med 1968;71:85.

วิชัย เหล่าสมบัติ. Beta-thalassemia minor ใน: วิชัย เหล่าสมบัติ, บรรณาธิการ. ธาลัสซีเมีย (Thalassenia). กรุงเทพฯ: โอ เอส พริ้นติ้ง เฮาส์ 2541:82-5.

Huisman TH. Level of Hb A, in heterozygotes and homozygotes for beta-thalassemia mutations : influence of mutations in the CACCC and ATAA motifs of the beta-globin gene promotor. Acta Haematol 1997;98:187-94.

ดาวน์โหลด

เผยแพร่แล้ว

2018-12-30

ฉบับ

ประเภทบทความ

นิพนธ์ต้นฉบับ (Original article)