การศึกษาชนิดของยีน PML-RARO ในมะเร็งเม็ดเลือดขาวเฉียบพลัน ชนิด APL โดยวิธี nested RT-PCR
คำสำคัญ:
Acute promyelocytic leukemia, Chromosome translocation, Nested PCRบทคัดย่อ
บทคัดย่อ : ผู้ป่วยมะเร็งม็ดเลือดขาวเฉียบพลัน APL มีความผิดปกติของโครโมโซมคู่ที่ 15 และ 17 ((15,17) ซึ่งทำให้ยืน PML และ RAR มาเชื่อมต่อกัน โดยที่ยืน PML เกิดรอยขาดได้ 3 ตำแหน่ง คือ intron 6 (bcr1), exon 6 (bcr2) และ intron 3 (bcr3) ส่วนยีน RAR
เกิดรอยขาดที่ intron 2 วัตถุประสงค์: เพื่อพัฒนาการตรวจหายีนลูกผสม PML/RAR
ที่เกิดจาก t(15 17 โดยวิธี nested RT-PCR และ ศึกษาชนิดต่างๆ ของยื่น PML/RAR
/ (bcr1, bcr2 และ bcr3) ในคนไทย วัสดุและวิธีการ: ตัวอย่างตรวจไขกระดูกหรือเลือดของผู้ป่วยมะเร็งเม็ดเลือดขาวเฉียบพลัน APL ที่ได้ผ่านการวินิจฉัยโดยการตรวจอิมมูโนฟีโนทัยป์และการตรวจโครโมโซมตามวิธีมาตรฐาน การตรวจหายีน PML RAR
: ใช้วิธี nested RT-PCR โดยมีชลล์ไลน์ NB4 ที่มี (15.17) เป็นตัวเปรียบเทียบ ผลการศึกษา: จากการดูลักษณะเชล์ล์และการตรวจอิมมูโนพี่โนทัยป์ มีผู้ป่วยที่ได้รับการรินิจฉัยเป็นโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาว APL ทั้งสิ้น 64 ราย โดยพบ bcr1, bcr2 และ bcr3 ร้อยละ 81.25, 3.125 และ 0 ตามลำดับ ผู้ป่วยที่มี t(15,17) จากการตรวจโครโมโซม (ก = 12) พบ bcr1 ร้อยละ 83.33 (10 ใน 12 ราย) และพบ ber 2 ร้อยละ 16.66 (2 ใน 12 ราย ) สำหรับผู้ป่วย APL ที่มีโครโมโชมปกติ (ก = 36) หรือตรวจโครโมโชมไม่ได้ (insufficient metaphases) (n = 16) ตรวจพบ PML-RAR
40 ราย (76.20%) สรุป: ตรวจพบยีน PML-RAR
ชนิด bcr1 มากที่สุดในผู้ป่วยไทยที่เป็นมะเร็งเม็ดเลือดขาวเฉียบพลันชนิด APL และเมื่อเปรียบเทียบกับผลจากการตรวจโครโมโซมวิธีปกติ พบว่าการตรวจหายีน PML-RAR
โดยวิธี nested RT-PCR มีความจำพาะและความไวมากกว่าโครโมโชมในการยืนยันการวินิจฉัย APL ระดับโมเลกุล
Downloads
เอกสารอ้างอิง
Warrell RP Jr, de The H, Wang ZY, Degos L. Acute promyelocytic leukemia. N Engl J Med 1993;329:177-89.
Lowenberg B, Downing JR, Bumnett A. Acute myeloid leukemia. N Engl J Med 1999;341:1051-62.
Grignani F, Fagioli M, Alcalay M, Longo L, Pandolfi PP, Donti E, et al. Acute promyelocytic leukemia: from genetics to treatment. Blood 1994;83:10-25.
Melnick A, Licht JD. Deconstructing a disease: RARalpha, its fusion partners, and their roles in the pathogenesis of acute promyelocytic leukemia. Blood 1999:93.3167-215.
Ruggero D, Wang ZG, Pandolfi PP.The puzzling multiple lives of PML and its role in the genesis of cancer. Bioessays 2000;22:827-35.
Pandolfi PP. Oncogenes and tumor suppressors in the molecular pathogenesis of acute promyelocytic leukemia. Hum Mol Genet 2001;10:769-75.
Slack JL, Arthur DC, Lawrence D, Mrozek K, Mayer RJ, Davey FR, et al. Secondary cytogenetic changes in acute promyelocytic leukemia-prognostic importance in patients treated with chemotherapy alone and association with the intron 3 breakpoint of the PML gene: a Cancer and Leukemia Group B study. J Clin Oncol 1997;15:1786-95.
Lo Coco F, Diverio D, Falini B, Biondi A, Nervi C, Pelicci PG. Genetic diagnosis and molecular monitoring in the management of acute promyelocytic leukemia. Blood 1999:94:12-22.
Lo-Coco F, Breccia M, Diverio D. The importance of molecular monitoring in acute promyelocytic leukaemia. Best Pract Res Clin Haematol 2003;16:503-20.
Basso G, Buldini B, De Zen L, Orfao A. New methodologic approaches for immunophenotyping acute leukemias. Haematologica 2001;86:675-92.
Kaleem 2, Crawford E, Pathan MH, Jasper L, Covinsky MA, Johnson LR, et al. Flow cytometric analysis of acute leukemias. Diagnostic utility and critical analysis of data. Arch Pathol Lab Med 2003;127:42-8.
Orfao A, Ortuno F, de Santiago M, Lopez A, San Miguel J. Immunophenotyping of acute leukemias and myelodysplastic syndromes. Cytometry 2004;58A:62-71.
Biondi A, Rambaldi A, Pandolfi PP, Rossi V, Giudici G, Alcalay M, et al. Molecular monitoring of the myl/retinoic acid receptor-alpha fusion gene in acute promyelocytic leukemia by polymerase chain reaction. Blood 1992;80:492-7.
van Dongen JJ, Macintyre EA, Gabert JA, Delabesse E, Rossi V, Saglio G, et al. Standardized RT-PCR analysis of fusion gene transcripts from chromosome aberrations in acute leukemia for detection of minimal residual disease. Report of the BIOMED-1 Concerted Action: investigation of minimal residual disease in acute leukemia. Leukemia 1999;13:1901-28.
Chomczynski P, Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol chloroform extraction. Anal Biochem 1987;162:156-9.
Degos L. The history of acute promyelocytic leukaemia. Br J Haematol 2003;122:539-53.
Lanotte M, Martin-Thouvenin V, Najman S, Balerini P, Valensi F, Berger R. NB4, a maturation inducible cell line with t(15;17) marker isolated from a human acute promyelocytic leukemia (M3). Blood 1991;77:1080-6.
Harris NL, Jaffe ES, Diebold J, Flandrin G, Muller-Hermelink HK, Vardiman J, et al. World Health Organization classification of neoplastic diseases of the hematopoietic and lymphoid tissues: report of the Clinical Advisory Committee meeting-Airlie House, Virginia, November 1997. J Clin Oncol 1999;17:3835-49.
Vardiman JW, Harris NL, Brunning RD. The World Health Organization (WHO) classification of the myeloid neoplasms. Blood 2002;100:2292-302.
Paietta E. Comments on the 2001 WHO proposal for the classification of haematopoietic neoplasms. Best Pract Res Clin Haematol 2003;16:547-59.
Hiorns LR, Min T, Swansbury GJ, Zelent A, Dyer MJ, Catovsky D. Interstitial insertion of retinoic acid receptor-alpha gene in acute promyelocytic leukemia with normal chromosomes 15 and 17. Blood 1994;83:2946-51.
Naoe T, Kudo K, Yoshida H, Horibe K, Ohno R. Molecular analysis of the t(15;17) translocation in de novo and secondary acute promyelocytic leukemia. Leukemia 1997;11(Suppl 3):287-8.
Chillon CM, Garcia-Sanz R, Balanzategui A, Ramos F, Fernandez-Calvo J, Rodriguez MJ, et al. Molecular characterization of acute myeloblastic leukemia according to the new WHO classification: a different distribution in Central-West Spain. Haematologica
:162-6.
Sucic M, Zadro R, Burazer B, Labar B, Nemet D, Mrsic M, et al. Acute promyelocytic leukemia M3: cytomorphologic, immunophenotypic, cytogenetic, and molecular variants. J Hematother Stem Cell Res 2002;11:941-50.
Douer D, Santillana S, Ramezani L, Samanez C, Slovak ML, Lee MS, et al. Acute promyelocytic leukaemia in patients originating in Latin America is associated with an increased frequency of the bcr1 subtype of the PML/RARalpha fusion gene. Br J Haematol 2003;122:563-70.
Benedetti L, Levin AA, Scicchitano BM, Grignani F, Allenby G, Diverio D, et al. Characterization of the retinoid binding properties of the major fusion products present in acute promyelocytic leukemia cells. Blood 199790:1175-85.
Burnett AK, Grimwade D, Solomon E, Wheatley K, Goldstone AH. Presenting white blood cell count and kinetics of molecular remission predict prognosis in acute promyelocytic leukemia treated with all-transretinoic acid: result of the Randomized MRC Trial. Blood 1999;93:4131-43.
ดาวน์โหลด
เผยแพร่แล้ว
ฉบับ
ประเภทบทความ
สัญญาอนุญาต
อนุญาตภายใต้เงื่อนไข Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
