ฤทธิ์ทางชีวภาพของโปรตีนไฮโดรไลเสทจากสารสกัดรกแพะ

Main Article Content

อรอนงค์ รักสวนจิก
สมปอง คล้ายหนองสรวง
จริยา หาญวจนวงศ์
วัชรี คุณกิตติ

บทคัดย่อ

รกแพะเป็นแหล่งของสารอาหารที่อุดมไปด้วยโปรตีนและกรดอะมิโน มีรายงานการศึกษาพบว่าสายโปรตีนหรือเปปไทด์ที่มีโมเลกุลขนาดเล็กลง อาจช่วยให้สารสกัดที่ได้ออกฤทธิ์ทางชีวภาพได้มากขึ้น วัตถุประสงค์: เพื่อศึกษาประสิทธิภาพของสารสกัดหยาบที่ได้จากการย่อยรกแพะในการออกฤทธิ์ทางชีวภาพ วิธีการทดลอง: ศึกษากระบวนการย่อยเพื่อลดขนาดของรกแพะโดยใช้เอนไซม์ปาเปน ตรวจสอบคุณสมบัติของโปรตีนไฮโดรไลเสทดังนี้ หาปริมาณโปรตีนรวมโดยวิธี Bradford protein assay ตรวจสอบขนาดโมเลกุลของโปรตีนไฮโดรไลเสทโดยวิธี Tricine-Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis (Tricine-SDS PAGE) และศึกษาฤทธิ์ในการต้านอนุมูลอิสระโดยวิธี Free radical scavenging (DPPH),  Inhibition of linoleic acid oxidation, Ferric reducing power และศึกษาฤทธิ์ในการต้านเอนไซม์ไทโรซิเนสโดยวิธี Mushroom tyrosinase inhibition ผลการทดลอง: %Yield ของโปรตีนไฮโดรไลเสทจากรกแพะได้เท่ากับ18.31±0.42% และมีปริมาณโปรตีนรวมเทียบเท่ากับ Bovine serum albumin 30.04±1.19% w/w โปรตีน/เปปไทด์ส่วนใหญ่ที่พบจะมีขนาดของโมเลกุลประมาณ  30 kDa การหาประสิทธิภาพในการต้านออกซิเดชันพบว่าที่ความเข้มข้นของโปรตีนไฮโดรไลเสท 6.25 mg/ml สามารถยับยั้งอนุมูลอิสระได้สูงกว่าสารมาตรฐานวิตามินซีที่ความเข้มข้น 0.156 mg/ml อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ และไม่แตกต่างกันทางสถิติเมื่อเทียบกับ Vitamin E acetate ที่ความเข้มข้น 83.5 mg/ml แต่สามารถยับยั้งอนุมูลอิสระได้น้อยกว่าTrolox ที่ความเข้มข้น 0.156 mg/ml  โปรตีนไฮโดรไลเสทที่ความเข้มข้น 1.5 mg/ml สามารถรีดิวซ์ Fe3+เทียบเท่ากับTrolox 15.74 mM ซึ่งน้อยกว่าสารมาตรฐาน vitamin C ที่ความเข้มข้น 0.3 mg/mlและโปรตีนไฮโดรไลเสท 1 mg/ml สามารถยับยั้งการเกิด lipid peroxidation ได้ 84.94% ซึ่งไม่แตกต่างกันทางสถิติเมื่อเทียบกับสารมาตรฐาน Butylated hydroxytoluene (BHT), Trolox ที่ความเข้มข้น 0.1 mg/ml และสารมาตรฐาน Glutathione (GSH) ที่ 1 mg/ml ผลการทดสอบประสิทธิภาพในการยับยั้ง  mushroom tyrosinase enzyme ที่ความเข้มข้นของโปรตีนไฮโดรไลเสท 41.67 mg/ml สามารถยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ tyrosinase ได้ 59.11%, สรุปผล: โปรตีน/เปปไทด์ไฮโดรไลเสทจากรกแพะมีประสิทธิภาพในการต้านอนุมูลอิสระและสามารถยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ไทโรซิเนสได้

Article Details

ประเภทบทความ
เภสัชศาสตร์ (Pharmaceutical Sciences)

เอกสารอ้างอิง

Ajibola, C. F., Fashakin, J. B., Fagbemi, T. N., &Aluko, R. E. (2011). Effect of peptide size on antioxidant properties of African yam bean seed (Sphenostylisstenocarpa) protein hydrolysate fractions.International Journal of Molecular Sciences, 12(10), 6685–6702.

Bradford, M. M. (1976). A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding.Analytical Biochemistry, 72(1), 248–254.

Frister, H., Meisel, H., &Schlimme, E. (1988). OPA method modified by use of N,N-dimethyl-2-mercaptoethylammonium chloride as thiol component. Fresenius’ ZeitschriftFrAnalytischeChemie, 330(7), 631–633. http://doi.org/10.1007/BF00473782

Khunkitti, W., Veerapan, P., &Hahnvajanawong, C. (2012). In vitro bioactivities of clove buds oil (Eugenia caryophyllata) and its effect on dermal fibroblast.Int J Pharm PharmSci, 4(Suppl 3), 556–560.

Kim, S.-Y., Je, J.-Y., & Kim, S.-K. (2007). Purification and characterization of antioxidant peptide from hoki (Johniusbelengerii) frame protein by gastrointestinal digestion. The Journal of Nutritional Biochemistry, 18(1), 31–38.

Langmaier, F., Mladek, M., Kolomaznik, K., &Sukop, S. (2001). Collagenous hydrolysates from untraditional sources of proteins.International Journal of Cosmetic Science, 23(4), 193–199.

Liu, C., Peng, D., Yang, J., Li, Y., & Li, J. (2010). Anti-oxidative and anti-aging activities of collagen hydrolysate. In III International Conference OnBiomedial Engineering And Informatics (BMEI) (pp. 1981–84). Retrieved from http://ieeexplore.ieee.org/xpls/abs_all.jsp?arnumber=5639440

Masaki, H. (2010). Role of antioxidants in the skin: Anti-aging effects. Journal of Dermatological Science, 58(2), 85–90. http://doi.org/10.1016/j.jdermsci.2010.03.003

Mendis, E., Rajapakse, N., Byun, H.-G., & Kim, S.-K. (2005). Investigation of jumbo squid (Dosidicusgigas) skin gelatin peptides for their in vitro antioxidant effects.Life Sciences, 77(17), 2166–2178.

Nakchum, L., & Kim, S. M. (2016). Preparation of squid skin collagen hydrolysate as an antihyaluronidase, antityrosinase, and antioxidant agent.Preparative Biochemistry and Biotechnology, 46(2), 123–130. http://doi.org/10.1080/10826068.2014.995808

Saiga, A., Tanabe, S., & Nishimura, T. (2003). Antioxidant Activity of Peptides Obtained from Porcine Myofibrillar Proteins by Protease Treatment. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 51(12), 3661–3667. http://doi.org/10.1021/jf021156g

Sarmadi, B. H., & Ismail, A. (2010). Antioxidative peptides from food proteins: a review. Peptides, 31(10), 1949–1956.

Schurink, M., van Berkel, W. J. H., Wichers, H. J., &Boeriu, C. G. (2007). Novel peptides with tyrosinase inhibitory activity.Peptides, 28(3), 485–495. http://doi.org/10.1016/j.peptides. 2006.11.023

Teng, D., Fang, Y., Song, X., &Gao, Y. (2011). Optimization of enzymatic hydrolysis parameters for antioxidant capacity of peptide from goat placenta.Food and Bioproducts Processing, 89(3), 202–208.

Tricine-SDS-PAGE : Article : Nature Protocols. (2006). Nat. Protocols, 1(1), 16–22. http://doi.org/10.1038/nprot.2006.4

Veerapan, P. (2011). In VitroAntioxidant Activities of Essential Oils. IJPS, 7(3), 30–38.

Wong, S. P., Leong, L. P., &Koh, J. H. W. (2006). Antioxidant activities of aqueous extracts of selected plants. Food Chemistry, 99(4), 775–783.

Zhuang, Y., Zhao, X., & Li, B. (2009). Optimization of antioxidant activity by response surface methodology in hydrolysates of jellyfish (Rhopilemaesculentum) umbrella collagen. Journal of Zhejiang University SCIENCE B, 10(8), 572–579. http://doi.org/10.1631/jzus.B0920081