วิธีวิเคราะห์บ่งชี้ความคงตัวของ trans-resveratrol ในตัวอย่างวัตถุดิบและรูปแบบเม็ด โดยเทคนิคโครมาโทกราฟีแบบของเหลวสมรรถนะสูงยิ่งยวด
Article Sidebar
Main Article Content
บทคัดย่อ
บทนำ: Trans-Resveratrol เป็นสารกลุ่มฟีนอลิกที่พบในผลไม้ตระกูลเบอร์รี่และถั่ว แสดงฤทธิ์ทางเภสัชวิทยาหลากหลาย มีวิธีวิเคราะห์หลายวิธีที่ถูกพัฒนาเพื่อหาปริมาณ t-resveratrol ในผลิตภัณฑ์ธรรมชาติแต่ยังไม่มีวิธีวิเคราะห์ใดที่ใช้บ่งชี้ความคงตัวของสารในรูปวัตถุดิบและรูปแบบเม็ด งานวิจัยนี้พัฒนาขึ้นเพื่อหาวิธีวิเคราะห์บ่งชี้ความคงตัวของสาร t-resveratrol โดยเทคนิค โครมาโทกราฟีแบบของเหลวสมรรถนะสูงยิ่งยวด (UPLC) และทดสอบความถูกต้องของวิธีตามข้อกำหนดของ The International Conference on Harmonization (ICH) นอกจากนั้นผู้วิจัยได้ทำการศึกษาความคงตัวของผลิตภัณฑ์ในสภาวะเร่ง ความคงตัวของสารละลายมาตรฐาน และความคงตัวในเครื่องฉีดตัวอย่างอัตโนมัติ วิธีดำเนินการวิจัย: พัฒนาวิธีวิเคราะห์ด้วย UPLC และทดสอบความถูกต้องของวิธีในหัวข้อ ความแม่น ความเที่ยง ความจำเพาะเจาะจง ขีดจำกัดการวิเคราะห์ขีดจำกัดการตรวจวัดปริมาณ ความเป็นเส้นตรง ช่วงการวิเคราะห์ ความทนของวิธี พร้อมศึกษาความคงตัวของผลิตภัณฑ์หลังเก็บในสภาวะเร่งเป็นเวลา 1 เดือน และเปรียบเทียบพื้นที่พีคระหว่างสารละลายมาตรฐานที่เก็บในอุณหภูมิต่างๆ กับที่เตรียมขึ้นใหม่ ผลการศึกษา: สภาวะ UPLC ที่เหมาะสมคือ ใช้คอลัมน์รีเวิร์สเฟส C18 เฟสเคลื่อนที่แบบเกรเดียนท์ระหว่างอะซิโตไนไตรล์และนํ้า เวลาวิเคราะห์ 3 นาที อัตราการไหล 0.4 มิลลิลิตร/นาที ตรวจวัดด้วย UV ความยาวคลื่น 306 นาโนเมตร พบว่าพีคของสารสลายตัวที่เกิดจากการเร่งปฏิกิริยาแยกออกจากพีคสารหลัก และพีคหลักมีความบริสุทธิ์ในทุกสภาวะการทดสอบ วิธีวิเคราะห์มีความเป็นเส้นตรงในช่วงความเข้มข้น 0.4 – 1.8 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร มีค่าสัมประสิทธิ์การกำหนด (r2) เท่ากับ 0.9999 การทดสอบความเที่ยงแบบภายในวันและต่างวัน มีค่าส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ (%RSD) น้อยกว่า 2.0 และมีค่าการได้กลับคืน (%recovery) ของวิธีเท่ากับ 99.04% และ 99.93% สำหรับตัวอย่างวัตถุดิบและรูปแบบเม็ดตามลำดับค่า LOD และ LOQ เท่ากับ 0.01 และ 0.02 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร ปริมาณของ t-resveratrol ที่วิเคราะห์ได้จากการเปลี่ยนแปลงสภาวะวิเคราะห์อยู่ในช่วง ±2% เทียบกับวิธีที่พัฒนาขึ้น ตัวอย่างคงตัวเป็นเวลา 1 เดือนเมื่อเก็บที่สภาวะ 40oC 75%RH สารละลายมาตรฐานคงตัวเป็นเวลา 25 วันที่อุณหภูมิ –20oC และ 2 วันเมื่อเก็บในเครื่องฉีดตัวอย่างอัตโนมัติที่อุณหภูมิห้อง สรุปผลการวิจัย: วิธีวิเคราะห์ที่พัฒนาขึ้นมีความแม่น ความเที่ยง ความน่าเชื่อถือและเหมาะสมที่จะเป็นวิธีวิเคราะห์บ่งชี้ความคงตัวของ t-resveratrol ในตัวอย่างวัตถุดิบและรูปแบบเม็ด
Article Details
กรณีที่ใช้บางส่วนจากผลงานของผู้อื่น ผู้นิพนธ์ต้อง ยืนยันว่าได้รับการอนุญาต (permission) ให้ใช้ผลงานบางส่วนจากผู้นิพนธ์ต้นฉบับ (Original author) เรียบร้อยแล้ว และต้องแนบเอกสารหลักฐาน ว่าได้รับการอนุญาต (permission) ประกอบมาด้วย
เอกสารอ้างอิง
Aggarwal BB , Bhardwaj A, Aggarwal RS. Role of Resveratrol in Prevention and Therapy of Cancer: Preclinical and Clinical Studies.Anticancer Res 2004; 2783-840.
Beňová B, Adam M, Pavlíková P, Fischer J. Supercritical fluid extraction of piceid, resveratrol and emodin from Japanese knotweed. J Supercrit Fluids 2010; 51(3): 325–30.
Carrizzo A, Forte M, Damato A, et al. Antioxidant effects of resveratrol in cardiovascular, cerebral and metabolic diseases. Food Chem Toxicol 2013; 61: 215–26.
Casas L, Mantell C, Rodríguez M, et al. Extraction of resveratrol from the pomace of Palomino fino grapes by supercritical carbon dioxide. J Food Eng 2010; 96(2): 304–8.
Chukwumah Y, Walker L, Vogler B, Verghese M. Profiling of bioactive compounds in cultivars of Runner and Valencia peanut market-types using liquid chromatography/APCI mass spectrometry. Food Chem 2012; 132(1): 525–31.
Chun-fu WU, Jing-yu Y, Fang W, Xiao-xiao W. Resveratrol: botanical origin, pharmacological activity and applications. Chin J Nat Med 2013; 11(1): 1–15.
Daodee S, Wangboonskul J, Yenjai C, Boonyarat C, Monthakantirat O. Determination of five carbazole alkaloids from the root of Clausena harmandiana by High Performance Liquid Chromatography. IJPS 2012; 8(2): 94-100.
ICH. Validation of a analytical Procedures: text and methodology Q2(R1). Guidance. 2005; 17.
Lee SS, Lee SM, Kim M, Chun J, Cheong YK, Lee J. Analysis of trans-resveratrol in peanuts and peanut butters consumed in Korea. Food Res Int 2004; 37(3): 247–51.
Liazid A, Palma M, Brigui J, Barroso CG. Investigation on phenolic compounds stability during microwave-assisted extraction. J Chromatogr A 2007; 1140(1-2):29–34.
Liu C, Wang L, Wang J, et al. Resveratrols in Vitis berry skins and leaves: their extraction and analysis by HPLC. Food Chem 2013; 136(2): 643–9.
Marqués JL, Porta G Della, Reverchon E, Renuncio J a. R, Mainar a. M. Supercritical antisolvent extraction of antioxidants from grape seeds after vinification. J Supercrit Fluids 2013; 82: 238–43.
Nováková L, Matysová L, Solich P. Advantages of application of UPLC in pharmaceutical analysis. Talanta 2006; 68(3): 908–18.
Nusuk C, Patarapanich C, Tuesuwan B. Development of modified extract and HPLC analytical method for determination of rutin in modified extract of Longan seed. IJPS 2011; 7(3): 14-22.
Pascual-Marti MC, Salvador A, Chafer A, Berna A. Supercritical fluid extraction of resveratrol from grape skin of Vitis inifera and determination by HPLC. Talanta 2001; 54: 735–40.
Phan-Thien K-Y, Wright GC, Lee NA. Peanut antioxidants: Part 2. Quantitation of free and matrix-bound phytochemicals in five selected genotypes with diverse antioxidant capacity by high performance liquid chromatography (HPLC). LWT - Food SciTechnol 2014; 57(1): 312–9.
Püssa T, Floren J, Kuldkepp P, Raal A. Survey of grapevine Vitis vinifera stem polyphenols by liquid chromatography-diode array detection-tandem mass spectrometry. J Agric Food Chem 2006; 54(20): 7488–94.
Rudolf JL, Resurreccion a. V a., Saalia FK, Phillips RD. Development of a reverse-phase high-performance liquid chromatography method for analyzing trans-resveratrol in peanut kernels. Food Chem. 2005; 89(4): 623–38.
Sales JM, Resurreccion a. V a. Maximising resveratrol and piceid contents in UV and ultrasound treated peanuts. Food Chem 2009; 117(4): 674–80.
Xiong Q, Zhang Q, Zhang D, Shi Y, Jiang C, Shi X. Preliminary separation and purification of resveratrol from extract of peanut (Arachis hypogaea) sprouts by macroporous adsorption resins. Food Chem 2014; 145: 1–7.
Yu J, Ahmedna M, Goktepe I. Effects of processing methods and extraction solvents on concentration and antioxidant activity of peanut skin phenolics. Food Chem 2005; 90(1-2): 199–206.
Zupančič Š, Lavrič Z, Kristl J. Stability and solubility of trans-resveratrol are strongly influenced by pH and temperature. Eur J Pharm Biopharm 2015; 93: 196–204.
