ผลของสารกระตุ้นต่อการสร้างสารกลุ่มโครมีนและไอโซฟลาโวนอยด์ ในการเพาะเลี้ยงรากลอยกวาวเครือขาว
Main Article Content
บทคัดย่อ
บทนำ : กวาวเครือขาวเป็นสมุนไพรไทยที่มีการนำมาใช้และเป็นที่รู้จักมานานในแง่ของการใช้เป็นยาอายุวัฒนะ บำรุงร่างกาย กวาวเครือขาวมีชื่อวิทยาศาสตร์ว่า Pueraria candollei Wall, ex Benth จัดเป็นพืชในวงศ์ Leguminosae ในบประเทศไทยพบกวาวเครือขาวสองสาย พันธ์ คือ p. candollei var. candollei (PC) และ p. candollei var. mirifica (PM) ซึ่งมีลักษณะทางพฤกษศาสตร์คล้ายคลึงกันแต่มีปริมาณสารสำคัญแตกต่างกัน จากรายงานการศึกษาพบว่า หัวกวาวเครือขาวมีองค์ประกอบเป็นสารกลุ่มไอโซฟลาโวนอยด์, โครมีน และอื่นๆ ซึ่งสารเหล่านี้มีฤทธิ์เป็นไฟโตเอสโตรเจน (phytoestrogen) การศึกษาวิจัยครั้งนี้จึงมุ่งเน้นถึงการศึกษาเพื่อเพิ่มขีดความสามารถในการผลิตสารกลุ่ม chromenes และ isoflavonoids ในรากลอย และศึกษาเปรียบเทียบปริมาณสารในกลุ่มดังกล่าวระหว่างการเพาะเลี้ยง กวาวเครือขาวแบบรากลอยกับรากธรรมชาติในกวาวเครือขาวทั้งงสองสายพันธ์ วัสดุและวิธีการ : ตรวจวัดปริมาณสารกลุ่มโครมีนโดยใช้ HPLC และใช้competitive ELISA ในการตรวจวัดสารกลุ่มไอโซฟลาโวนอยด์ แล้ววิเคราะห์ค่าทางสถิติโดยใช้ ANOVA ผลการศึกษา : พบว่า 200 µM methyl jasmonate และ 0.5 mg/L yeast extract สามารถกระตุ้นการสร้างสารกลุ่ม โครมีนได้อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ หวังการเติมสารกระตุ้น 3 วันและ 6 วัน ตามลำดับ โดยมีปริมาณโครมีน 17.03 และ 17.47 µg/g น้ำหนักแห้ง ตามลำดับ ซึ่งสูงกว่ากลุ่มควบคุมสองเท่า สารกระตุ้นทั้งสองชนิดดังกล่าวยังกระตุ้นการสร้างในสารกลุ่มไอโซฟลาโวนอยด์หลังการเติมสารกระตุ้น 3 วัน พบ ปริมาณไอโซฟลาโวนอยด์ 16.06 และ 14.65 mg/g น้ำหนักแห้ง ตามลำดับ ซึ่งสูงกว่ากลุ่มควบคุมสองเท่า การศึกษาเปรียบเทียบ ปริมาณสารทั้งสองกลุ่มดังกล่าวระหว่างการเพาะเลี้ยงกวาวเครือขาวแบบรากลอยกับรากธรรมชาติทั้งในกวาวเครือขาวทั้งสองสายพันธุ์พบ ปริมาณ โครมีนในรากลอยของ PM, รากลอยของ PC, ราก PM และราก PC ดังนี้ 5.51, 4.62, 18.86 และ 17.10 µg/g น้ำหนักแห้ง ตามลำดับ ส่วนปริมาณไอโซฟลาโวนอยด์พบในรากลอยของ PM, รากลอยของ PC, ราก PM และราก PC ดังนี้ 7.72, 9.10, 6.64 และ 7.05 mg/g น้ำหนักแห้ง ตามลำดับ สรุปผล : สารกระตุ้น methyl jasmonate และ yeast extract สามารถกระตุ้นการสร้างสารกลุ่มโครมีนและไอโซฟลาโวนอยด์ในการเพาะเลี้ยงกวาวเครือขาว (P. candollei var. mirifica) แบบรากลอยได้ ส่วนผลการศึกษาเพื่อ เปรียบเทียบปริมาณสารทั้งสองกลุ่มดังกล่าวระหว่างการเพาะเลี้ยงกวาวเครือขาวแบบรากลอยกับรากธรรมชาติทั้งในกวาวเครือขาวทั้งสองสายพันธุ์พบว่า ปริมาณโครมีนในรากธรรมชาติของกวาวเครือขาวทั้งสองสายพันธุ์สูงกว่ารากธรรมชาติ ประมาณ 4 เท่า แต่พบปริมาณไอโซฟลานอยด์ในรากลอยมากกว่ารากธรรมชาติ
Article Details
กรณีที่ใช้บางส่วนจากผลงานของผู้อื่น ผู้นิพนธ์ต้อง ยืนยันว่าได้รับการอนุญาต (permission) ให้ใช้ผลงานบางส่วนจากผู้นิพนธ์ต้นฉบับ (Original author) เรียบร้อยแล้ว และต้องแนบเอกสารหลักฐาน ว่าได้รับการอนุญาต (permission) ประกอบมาด้วย
เอกสารอ้างอิง
Kerr A. A reputed rejuVenator. J Siam Soc. (Natural History Suppl.). 1932; 8: 336-338.
Matsumura A, Ghosh A, Pope G.s, Darbre P.D. Comparative study of oestrogenic properties of eight phytoestrogens in MCF7 human breast cancer cells. J. steroid Biochem. & Mol. Biol. 2005; 94: 431-443.
Yusakul G, Putalun W, Udomsin o, Juengwatanatrakul T, Chaichantipyuth c. Comparative analysis of the chemical constituents of two varieties of Pueraria candollei. Fitoterapia. 2011; 82(2): 203-207.
Chansakaow ร, Ishikawa T, Sekine K, Okeda M, Higuchii Y, Kudo M and Chaichantipyuth. Isoflavonoids from Pueraria mirifica and their estrogenic activity. Planta Med. 2000; 66: 572-575.
Taylor M. Alternative to HRT: An evidence-based review. IntJFertil Menopausal stud. 2003; 48(2):64-68.
Urasopan N, Hamada Y, Cherdshewasart W, Malaivijitnond S. Preventive effects of Pueraria mirifica on bone loss in ovariectomized rats. Maturitas. 2008; 59(2): 137-148.
Cherdshewasart W and Sutjit W. Correlation of antioxidant activity and major isoflavonoid contents of the phytoestrogen-rich Pueraria mirifica and Pueraria lobata tubers. Phytomedicine. 2008; 15(1-2): 38¬43.
Khitkal B, Kupittayanant S, Rangsriwatananon K, Manakasema Y. Antioxidant properties of puerarin and genistein from White Kwao Krua induced by elicitors and their antihyperglycemic effect on rats. Suranaree J. Sci. Technol. 2009; 17(1):27-37.
Cherdshewasart W, Subtang S and Dahlan พ. Major isoflavonoid contents of the phytoestrogen rich¬herb Pueraria mirifica in comparison with Pueraria lobata. J Pharm Biomed Anal. 2007; 43(2):428- 434.
Udomsuk L, Jarukamjorn K, Tanaka H and Putalun W. Isoflavonoid production in hairy roots culture of Pueraria candollei. Zeitschrift fur Naturforschung Section C-A Journal of Biosciences. 2009; 64(9¬10): 687-691.
Boonsnongcheep P, Korsangruang S, Soonthornchareon- non N, Chintapakorn Y, Saralamp p, Prathanturarug S. Growth and isoflavonoid accumulation of Pueraria candollei var. candollei and p. candollei var. mirifica cell suspension cultures. Plant Cell Tiss Organ Cult. 2010; 101:119-126.
Korsangruang S, Soonthornchareonnon N, Chintapakorn Y, Saralamp p, Prathanturarung S. Effects of abiotic and biotic elicitors on growth and isoflavonoid accumulation in Pueraria candollei var. candollei and p. candollei var. mirifica cell suspension culture. Plant Cell Tiss Organ Cult. 2010; 103: 333-342.
Udomsuk L, Jarukamjorn K, Tanaka H, Putalun W. Improved isoflavonoid production in Pueraria candollei hairy root cultures using elicitation. Biotechnology Letters. 2011; 33(2): 369-374.
Chansakaow S, Ishikawa T, Sekine K, Okeda M, Higuchi Y and Chaichantipyuth. Identification of deoxymiroestrol as the actual rejuvenating principle of “kwao keur”, Pueraria mirifica. The known miroestrol may be an artifact. J. Nat Prod. 2000; 63(2): 173-175.
Pongkitwitoon B, Sakamoto ร, Tanaka H, Tsuchihashi R, Kinjo J, Morimoto S and Putalun W. Enzyme- linked immunosorbent assay for total isoflavonoids in Pueraria candollei using anti-puerarin and anti- daidzin polyclonal antibodies. Planta Medica. 2010; 76: 831-836.
Sasaki K, Mito K, Ohara K, Yamamoto H, Yazaki K. Cloning and characterization of naringenin 8- prenyltransferase, a flavonoid-specific prenyltransferase of Sophora flavescens. Plant Physiol. 2008; 146: 1075-1084.
Akashi T, Sasaki K, Aoki T, Ayabe S, Yazaki K. Molecular cloning and characterization of a cDNA for pterocarpan 4-dimethylallyltransferase catalyzing the key prenylation step in the biosynthesis of glyceollin, a soybean phytoalexin. Plant Physiol. 2009; 149: 683-693.
Yu o and McGonigle B. Metabolic engineering of isoflavone biosynthesis. Adv Agr. 2005; 86:147¬190
Dewick PM. Medicinal natural products: a biosynthetic approach. UK: Wiley; 2009.