การสังเคราะห์และการปรับแต่งเพื่อเชื่อมติดชิ้นส่วน Fab แอนติบอดีที่จำเพาะ ต่ออะฟลาท็อกซินบี1 บนอนุภาคทองคำขนาดนาโน
Article Sidebar
Main Article Content
บทคัดย่อ
บทนำ: อนุภาคทองคำขนาดนาโนเป็นหนึ่งในโลหะที่มีคุณสมบัติทางแสงที่ดีและนำมาประยุกต์ใช้อย่างมากในงานชีวแพทย์ศาสตร์ เทคโนโลยีชีวภาพและงานตรวจวิเคราะห์ต่าง ๆ ชิ้นส่วน Fab แอนติบอดีมีความจำเพาะต่อสารอะฟลาท็อกชินบี 1 ถูกสร้างขึ้นให้ห้องปฏิบัติการเรา มีหลายปัจจัยที่ส่งผลต่อการเชื่อมชิ้นส่วน Fab เข้ากับอนุภาคทองคำ การศึกษาสภาวะที่เหมาะสมจึงมีความจำเป็นต่อ การเชื่อมชิ้นส่วน Fab เข้ากับอนุภาคทองคำ ซึ่งสามารถนำไปใช้ตรวจหาสารอะฟลาท็อกซิน บี1 ได้โดยอาศัยคุณสมบัติทางแสงของอนุภาคทองคำ วัสดุและวิธีการ: การศึกษานี้ ผู้วิจัยทำการสังเคราะห์อนุภาคทองคำขนาดนาโน ตามวิธีของเทอร์วิทซ์ เราศึกษาผลของ pH และความเข้มข้นของชิ้นส่วน Fab แอนติบอดีต่อการเชื่อมติดบนอนุภาคทองคำ หวังจากเหนี่ยวนำการตกตะกอนด้วยเกลือ จะ สังเกตเห็นสีที่เปลี่ยนไปและใช้คุณสมบัติการดูดกลืนแสงเป็นตัวกำหนดสภาวะที่เหมาะสม Indirect-ELISA ถูกใช้วัดปริมาณแอนติบอดีที่ เหลือจากการติดบนอนุภาคเพื่อยืนกันผลการเชื่อมติด ผลการศึกษา: ค่าการดูดกลืนแสงสูงสุดของอนุภาคที่ทำการเชื่อมติดแล้วเพิ่มจาก 520 เป็น 532 นาโนเมตร การเพิ่ม pH ไม่มีผลต่อขนาดและสี อัตราส่วนความเข้มข้นของชิ้นส่วน Fab-AFB1 ต่ออนุภาคทองคำ คือ 0.71 อัตราส่วนที่น้อยกว่าไม่สามารถป้องกันการรวมกลุ่มตกตะกอนของอนุภาคทองคำได้ indirect-ELISA เผยให้เห็นว่าจุดอิ่มตัวของการเชื่อมติดชิ้นส่วน Fab-AFB1 บนอนุภาคทองคำเกิน กว่า 3.53 สรุปผล: สามารถเชื่อมชิ้นส่วน Fab ที่จำเพาะต่อสารอะฟลาท็อกซิน ปี1 ลงบน อนุภาคทองคำได้สำเร็จสามารถนำไปประยุกต์ใช้ได้หลากหลายและมีประสิทธิภาพ
Article Details
กรณีที่ใช้บางส่วนจากผลงานของผู้อื่น ผู้นิพนธ์ต้อง ยืนยันว่าได้รับการอนุญาต (permission) ให้ใช้ผลงานบางส่วนจากผู้นิพนธ์ต้นฉบับ (Original author) เรียบร้อยแล้ว และต้องแนบเอกสารหลักฐาน ว่าได้รับการอนุญาต (permission) ประกอบมาด้วย
References
Frens G. Particle size and sol stability in metal colloids. Colloid Polym Sci. 1972; 250(7): 736-741.
Geoghegan W D. The effect of three variables on adsorption of rabbit IgG to colloidal gold. J Histochem Cytochem. 1988 Apr; 36(4): 401-407.
Hermanson G T. Part III: Preparation of colloidal gold- labeled proteins. Bioconjugate technique. Rockford, Illinois USA: Elsever; 2008.
Kimling J, Maier M,Okenve B, et al. Turkevich Method for Gold Nanoparticle Synthesis Revisited. J Phys Chem B. [doi: 10.1021/jp061667w]. 2006
/08/01; 110(32): 15700-15707.
Miura S, Gan J-W, Brzostowski J, et al. Functional Conservation for Lipid storage Droplet Association among Perilipin, ADRP, and TIP47 (PAT)-related Proteins in Mammals, Drosophila, and Dictyostelium. J. Biol. Chem. 2002 August 30, 2002; 277(35): 32253-32257.
Nghiem T H L, La T H, Vu X H, et al. Synthesis, capping and binding of colloidal gold nanoparticles to proteins. Adv. Nat. Sci: Nanosci. Nanotechnol. 2010;1.
Nichtl A H, DE), inventor Roche Diagnostics GmbH (DE), assignee. Gold conjugates containing detergent. United States2004.
Putkam R, Tangkeangsirisin W. Selection and characterization of Fab monoclonal antibody specific to Aflatoxin B1 using Phage Display Technology. 2007.
Putkam R, Tangkeangsirisin W. Selection and Characterization of Fab Monoclonal antibody specific to Aflatoxin B1 Using Phage Display Technology: Silpakorn Univercity; 2008.
Sau T K, Pal A, Jana N R,Wang z L,Pal T. Size controlled synthesis of gold nanoparticles using photochemically prepare seed particles J Nanopart Res. 2001; 3: 257-261.
Sereemaspan A, Chirathaworn C, Chantaramalai T, Kongthong N, Suwancharoen D. Detection of Leptospira in urine using anti-Leptospira-coated gold nanoparticles. Comp. Immunol. Microbiol. Infect. Dis. 2009.
Turkevich J. Colloidal gold. Part I. Gold Bull. 1985;18(3):86-91.
Turkevich J, Stevenson p C, Hillier J. A study of the nucleation and growth processes in the synthesis of colloidal gold. Discussions of the Faraday Society. 1951; 11: 55-75.
Wang S, Zhang C, Wang J, Zhang Y. Development of colloidal gold-based flow-through and lateral-flow immunoassays for the rapid detedtiion of the insecticide carbaryl. Analytica Chimica Acta. 2005; 546: 161-166.
Yeh C-H, Hung C-Y, Chang T C, Lin H-P, Lin Y-C. An immunoassay using antibody-gold nanoparticle conjugate, silver enhancement and flatbed scanner. Microfluid Nanofluid. 2009; 6: 85-91.