การศึกษาบทบาทของสารควอรัมเซนซิงเชิงโมเลกุลชนิดทริปโตฟอล ต่อการเจริญของเชื้อราก่อโรคแบบรุกราน

บทคัดย่อ

โรคติดเชื้อราเป็นปัญหาสาธารณสุขที่สำคัญทั่วโลก ซึ่งส่งผลกระทบอย่างมากต่อมนุษย์ เนื่องจากมีความถี่ในการติดเชื้อรามากขึ้นโดยเฉพาะผู้ที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่องการติดเชื้อราแบบรุกรานสามารถรักษาได้ยาก เนื่องจากเป็นอันตรายถึงชีวิต วินิจฉัยยาก มีแนวทางการรักษาที่จำกัด เนื่องจากเชื้อราถูกจัดอยู่ในกลุ่มยูคาริโอต (Eukaryote) ซึ่งมีลักษณะคล้ายเซลล์คน จึงอาจมีผลข้างเคียงต่อผู้ป่วยค่อนข้างสูง เช่น ยากลุ่มโพลิอีน (Polyenes) ยากลุ่มเอโซล (Azoles) และยากลุ่มเอไคโนแคนดิน (Echinocandins) สารควอรัมเซนซิงเชิงโมเลกุล ชนิดทริปโตฟอล เป็นสารแมทาบอไลต์ทุติยภูมิที่ผลิตได้จากยีตส์ โดยมีการค้นพบว่ามีผลต่อการยับยั้งการเจริญของเชื้อราก่อโรค งานวิจัยนี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลของทริปโตฟอลต่อการเจริญของเชื้อราที่ก่อโรคแบบรุกราน (systemic mycosis) โดยศึกษาการยับยั้งของเชื้อรา Histoplasma capsulatum, Talaromyces marneffei, Aspergillus fumigatus, Cryptococcus neoformans, Candida parapsilosis และ Lodderomyces elongisporus พบว่ามีค่าความเข้มข้นที่น้อยที่สุดที่สามารถยับยั้งเชื้อรา (MIC) ได้อยู่ที่ 6.25, 3.12, 25, 3.12, 12.5 และ 12.5 mM และมีค่าความเข้มข้นที่น้อยที่สุดที่สามารถฆ่าเชื้อรา (MFC) ได้อยู่ที่ 50, 3.12, 50, 6.25, 25 และ 25 mM ตามลำดับ นำความเข้มข้นของทริปโตฟอลที่ 3.12 และ 31.2 mM (10 เท่าของค่า MIC) มาทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็งปอดชนิด A549 โดยการย้อม Trypan blue พบว่าเซลล์ A549 มีร้อยละของการรอดชีวิตของเซลล์อยู่ที่ 98.94 และ 1.09 ตามลำดับ ทำการทดสอบความเป็นพิษต่อ mitochondria ของเซลล์ A549 โดยอาศัยเทคนิค MTT assay พบว่า มีร้อยละของการมีชีวิตของเซลล์อยู่ที่ 66.31±2.91% และ 6.30±0.28 ตามลำดับ จากการทดสอบผลของสารทริปโตฟอลต่อการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส โดยการย้อมเซลล์ด้วย acridine orange-ethidium bromide (AO/EB) ศึกษาภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบฟลูออเรสเซนส์ พบว่ามีร้อยละการตายแบบอะพอพโทซิสเท่ากับ 11 และ 93 ตามลำดับ