การศึกษาในห้องปฏิบัติการเพื่อแสดงศักยภาพของควอลัมเซนซิงโมเลกุลจากเชื้อรา ชนิดทริปโตปอล (Trytophol) ในการต้านการเจริญของเชื้อรากลุ่มดื้อยาต้านเชื้อรา

บทคัดย่อ

บทคัดย่อ
เชื้อรากลุ่ม Candida spp. และ Aspergillus spp. มีอัตราการดื้อยาหรือการตอบสนองต่อยาต้านเชื้อราชนิด Azole เพิ่มมากขึ้น จากการศึกษา tryptophol เป็น fungal quorum sensing molecules ที่มีบทบาทต่อการเจริญของเชื้อรา จากข้อมูลดังกล่าวข้างต้น ผู้วิจัยจึงเห็นความสำคัญของสาร tryptophol ที่มีบทบาทในการยับยั้งการเจริญของเชื้อรา โดยการศึกษาวิจัยนี้จะเป็นการศึกษาในห้องปฏิบัติการเพื่อพิจารณาศักยภาพของสาร tryptophol ในการควบคุมการเจริญของเชื้อรา C. albicans และ A. fumigatus ชนิดตอบสนองและชนิดดื้อยากลุ่ม azole และศึกษาความเป็นพิษของ tryptophol ในความเข้มข้นที่สามารถยับยั้งการเจริญของเชื้อรา C. albicans และ A. fumigatus ชนิดตอบสนองและชนิดดื้อยากลุ่ม azole ในเซลล์ไฟโบรบลาสต์จากการทดลองผลของการยับยั้งเชื้อรา C. albicans และ A. fumigatus ชนิดตอบสนองและชนิดดื้อยากลุ่ม Azole พบว่าค่าความเข้มข้นที่น้อยที่สุดที่สามารถยับยั้งเชื้อ (MIC) ได้ อยู่ที่ 2 และ 8 mM ตามลำดับ เมื่อนำความเข้มข้นของ tryptophol มาทดสอบความเป็นพิษต่อ mitochondria ของเซลล์ไฟโบรบลาสต์ โดยอาศัย
เทคนิค MTT Assay พบว่าที่ความเข้มข้น 2 และ 4 mM ไม่เป็นพิษต่อ mitochondria ของเซลล์ไฟโบรบลาสต์มีร้อยละของการมีชีวิตอยู่ที่ 113.86± 9.34 และ 105.08±13.66 ตามลำดับ และเริ่มเป็นพิษต่อเซลล์ที่ความเข้มข้น 8 mM จากการทดสอบการตายของเซลล์แบบ Apoptosis ของเซลล์ไฟโบรบลาสต์ ด้วยวิธี Ethidium bromideAcridine orange staining assay พบว่าที่ 2 และ 4 mM มีการเกิด apoptosis อยู่ที่ 46 และ 40.2% ตามลำดับ ส่วนที่ความเข้มข้น 8-64 mM มีการเกิด apoptosis อยู่ที่ 100% และค่า Relative ratio ของ tryptophol ที่นำมากระตุ้นเซลล์ไฟโบรบลาสต์ พบว่าการแสดงออกของยีน caspase-8 และ CARD-9 ลดลงที่ ความเข้มข้นของ tryptophol ที่ 2 และ 4 mM และเพิ่มขึ้นที่ความเข้มข้นของ tryptophol ที่ 8-64 mM
จากผลที่ได้ พบว่าความเข้มข้นของ tryptophol ที่ 8 mM เป็นความเข้มข้นที่สามารถยับยั้งเชื้อได้ทั้งเชื้อรา C. albicans และ A. fumigatus ชนิดที่ตอบสนองและชนิดดื้อยากลุ่ม Azole แต่ยังมีข้อจำกัดของ Tryptophol ที่มีผลต่อการเกิด apoptosis ของเซลล์ไฟโบรบลาสต์