The first Thai patient had a blood group allele that was CD36 heterozygous

Abstract

Abstract:

Introduction: CD36, or Nak^a (GPIV), is a glycoprotein found on platelet membranes and other cells, such as megakaryocytes, monocytes, endothelial cells, and adipocytes. It is also expressed at low levels in reticulocytes. In June 2023, the ISBT Working Party of Red Cell Immunogenetics and Blood Group Terminology (WP-RCIBGT) established CD36 as a new blood group system. Objective: To investigate the red blood cell (RBC) antibody, phenotype, and genotype in a thalassemia patient who required blood transfusion but could not find compatible blood that may be related to the CD36 new blood group. Materials and Methods: The conventional tube test (CTT) and column agglutination test (CAT) monitored red blood cell phenotype and antibody investigation. The Immucor BioArray HEA Precise BeadChipTM Kit performed genetic analyses. Next-generation sequencing (NGS) was performed using the Illumina DNA Prep with Enrichment Kit to identify variants relative to the reference sequence. The platelet antibody was performed to confirm anti-CD36 by monoclonal antibody-specific immobilization of platelet antigens (MAIPA). Results: The antibody investigation showed anti-E, -c, -Jk^a, -unidentified with cold autoantibody. Interestingly, the NGS result showed gene variation in CD36 (CD36) nucleotide substitution (c.380C>T), which leads to the missense amino acid (p.[Ser127Leu]) in the CD36 blood group protein. These changes were found in 191 of 409 DNA sequence reads, which are consistent with heterozygosity for c.380C>T. Conclusion: The new finding is that CD36 is at a heterozygous level (c.380C>T) in Thai patient. The autoantibody caused the incompatible crossmatch, not a high titer low avidity (HTLA)-related antibody.

บทคัดย่อ

บทนำ CD36 หรือ Nak^a เป็นไกลโคโปรตีนที่พบได้บนผิวเซลล์เกล็ดเลือด และเซลล์อื่นๆ เช่น เมกาคาริโอไซต์ โมโนโซต์ เซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือด เซลล์ไขมัน และพบการแสดงออกได้ต่ำๆ บนเม็ดเลือดแดงตัวอ่อน ในเดือนมิถุนายนปี ค.ศ. 2023 CD36 ได้รับการขึ้นทะเบียนเป็นหมู่เลือดใหม่จากคณะทำงาน ISBT Working Party of Red Cell Immunogenetics and Blood Group Terminology (WP-RCIBGT) การแสดงออกของ CD36 deficiency สามารถแบ่งออกได้ 2 กลุ่มคือ CD36 deficiency type I ที่ไม่มีการแสดงออกของ CD36 ทั้งบนผิวเกล็ดเลือด และโมโนไซต์ และ CD36 deficiency type II ที่ไม่มีการแสดงของ CD36 เฉพาะบนเกล็ดเลือด วัตถุประสงค์ เพื่อจัดหาเลือดที่เหมาะสมและปลอดภัยให้กับผู้ป่วยธาลัสซีเมีย วัสดุและวิธีการ การทดสอบหาแอนติบอดี และแอนติเจนบนผิวเม็ดเลือดแดงใช้เทคนิค CTT และ CAT ในส่วนการทดสอบทางลักษณะพันธุกรรม HEA ใช้ชุด Kit Immucor BioArray HEA Precise และตรวจหาลำดับเบสทางพันธุกรรมโดยใช้เทคนิค next-generation sequencing และทดสอบหาแอนติบอดีต่อแอนติเจนของเกล็ดเลือดด้วยเทคนิค monoclonal antibody-specific immobilization of platelet antigens (MAIPA) ผลการศึกษา พบว่าผู้ป่วยมีการสร้างแอนติบอดีต่อแอนติเจนของเม็ดเลือดแดงคือ anti-E-,  -c, -Jk^a, -unidentified และ cold antibody จากการตรวจลำดับเบสของสารพันธุกรรมด้วยเทคนิค next-generation sequencing พบว่ามีการเปลี่ยนแปลงลำดับเบส ของหมู่เลือด CD36 (c.380C>T) ซึ่งนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงกรดอะมิโน ทำให้หมู่เลือด CD36 มีการแสดงออกในรูปแบบ heterozygous สรุป จากการศึกษาพบว่า การที่ผู้ป่วยมีผลการตรวจความเข้ากันได้กับเลือดผู้บริจาคให้ผล incompatible อาจเกิดจาก autoantibody เท่านั้น ไม่ได้เกี่ยวข้องกับแอนติบอดีในกลุ่ม HTLA และจากการตรวจลำดับเบสของสารพันธุกรรม ทำให้พบการแสดงออกของหมู่เลือด CD36 ในรูป heterozygous