การวิเคราะห์ Fetal Hemoglobin เพื่อการวินิจฉัยก่อนคลอด Homozygous alpha-Thalassemia 1 ด้วยวิธี High Performance Liquid Chromatography
คำสำคัญ:
PND, Homozygous alpha-thalasemia 1, Fetal Hb typing, HPLCบทคัดย่อ
บทคัดย่อ: วิธีการวินิจฉัยก่อนคลอดของโรค homozygous alpha-thalassemia 1 (Hb Bart's hydrops fetalis) ที่นิยมใช้กันอยู่ในปัจจุบันคือ ใช้วิธีการวิเคราะห์ DNA ที่ได้จากการทำ chorionic villi sampling วิธีนี้ แม้มีความแม่นยำสูง และสามารถให้การวินิจฉัยก่อนคลอดได้ตั้งแต่อายุครรภ์ 8-12 สัปดาห์ แต่มีข้อเสียคือ มีชันตอนทางห้องปฏิบัติการที่ค่อนข้างยุ่งยาก และอาจให้การวินิจฉัยผิดพลาดได้ จาการปนปื้อนของเนื้อเนื้อเยื่อจากมารดา การใคราะห์ชนิดของ Hb เช่น Hb F และ Hb A ซึ่งไม่สมารถสร้างได้ในฟิตัส ที่เป็นโรค Hb Bart's hydroos fetais จะเป็นอีกทางเลือกหองวิธีการวินิจวินิจฉัยก่อนคลอด วิธีการ
เลือดฟีตัสอายุ 18-22 สัปดาห์ ที่ได้จากการทำ cordocentesis ของหญิงฝากครรภ์ที่อาจให้บุตรเป็นโรค homozygous alpha-thalassemia 1 32 ราย ได้นำมาวิเคราะห์ด้วยวิธี PCR of-thalassemia 1 (SEA type) และวัดส่วนของ HBb Hb ต่างๆ ในเครื่อง automated HPLC ผลการศึกษา: จากจำนวนฟิตัส 32 ราย ตรวจด้วยวิธี PCR alpha-thalassemia 1 พบเป็น homozygous alpha-thalassemia 1 8 ราย เป็น alpha-thalassemia 1 trait 14 ราย เป็น Hb E/alpha-thalassemia 1 3 ราย และไม่พบ alpha-thalassemia 1 gene 7 ราย ผลการศึกษา fetal Hb typing ของแต่ละกลุ่มข้างต้น พบว่ามีภาพ chromatogram ที่จำเพาะคือ พวกที่เป็น homozygous alpha-thalassemia 1 chromatogram จะมึแต่ peak ของ unbound Hb (Hb Bart's และ Hb Portland) และไม่มี Hb F Hb A และ Hb A2 chromatogram ของ alpha-thalassemia 1 trait ทุกรายมี peak ของ unbound Hb, peak ของ pre Hb F, peak ของ Hb F และ peak ของ Hb A และ chromatooram 160 ของฟีตัสปกติทุกรายมี peak ของ Hb F และ Hb A ไม่มี Hb A2 สัดส่วนของ Hb A อยู่ระหว่าง 4-7% สัดส่วนนี้ไม่เปลี่ยนแปลงในช่วงอายุ 18-22 สัปดาห์ วิจารณ์และสรุป: การวิเคราะห์ชนิดของ Hb ด้วย HPLC สะดวกรวดเร็วไม่มีความยุ่งยากให้ผลสอดคล้องและตรงกับวิธี PCR alpha-thalassemia 1 โดย fetal Hb typing ของ homozygous alpha-thalassemia 1 มีลักษณะจำเพาะ กล่าวคือไม่พบมีสัดส่วนของ Hb F และ Hb A ซึ่งต่างจากฟิตัสที่เป็น alpha-thalassemia 1 trait และฟีตัสปกติซึ่งพบทั้ง Hb F และ Hb A วิธี fetal Hb typing ด้วย automated HPLC สามารถใช้เป็นวิธีวินิจฉัยก่อนคลอดของโรค homozygous alpha-thalasemia 1 ได้ มีความถูกต้องและแม่นยำสูง วิธีการวิเคราะห์ไม่มีขั้นตอนที่ยุ่งยาก ดังนั้นวิธีนี้น่าจะเหมาะสมกับประเทศไทยที่ใช้สำหรับการวินิจฉัยก่อนคลอดของหญิงเสียงที่อาจให้บุตรเป็นโรค homozygous alpha-thalassemia 1 ในโครงการการควบคุมและการป้องกันโรคธาลัสซีเมียชนิดร้ายแรง
Downloads
เอกสารอ้างอิง
Sanguansermsri T, Steger HF, Sirivatanapa P, et al. Prevention and Control of Severe Thalassemia Syndrome: Chiang Mai Strategy. Thai J Hematol Transf Med 1998;8:207-14.
Lemmens-Zygulska M, Eibel A, Helbig B, Sanguansermsri T, Horst J, Flatz G. Prevalence of alha-thalassemia in northem Thailand. Hum Genet 1996,98.345-7.
Sanguansermsri T, Phumyu N. Chomchuen S, Steger HP. Screening for alpha-thalassemia-1 heterozygotes in expecting couples by the combination of a simple erythrocyte osmotic fragility test and a PCR based method. Community Genetics 19999:1 in press.
Budsakorn Kitsirisakul, Heinrich F Steger, Torpong Sanguansermsri. Frequency of alpha-thalassemia-1 of the southeast asian-type among pregnant women in northern Thailand determined by PCR technique. Southeast Asian J Trop Med Public Health 1996;35: 362-3.
Betke K, Sanguansermsri T. Zytologische Blutfarbstoff differenzierung Moglichkeiten, Ergibnisse und Nutzanwendungen. Munch Med Wschr 1972;114:1099-104.
VARIANTTM Beta-Thalassemia Short Progam Instruction Manual. Bio-Rad Diagnostics, California, USA, 1994.
ต่อพงศ์ สงวนเสริมศรี, มาริดา พรพัฒน์กุล, ปราณี ฟู่เจริญ, สุพรรณ ฟู่เจริญ, ทัศนีย์ เล็บนาค. Diagnosis of thalassemia and abnormal hemoglobins by automated HPLC. ใน: ทัศนีย์ เล็บนาค, ปราณี ฟูเจริญ บรรณาธิการ. ธาลัสซีเมีย คู่มือการวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการ. มูลนิธิโรคโลหิตจางธาลัสซีเมียแห่งประเทศไทย 2540:65-73.
Steger HF, Phumyu N, Sanguansermsri T. The development of a PCR kit for the detection of alpha-thalassemia-1 of the Southeast Asian type (SEA). Chiang Mai Medical Bulletin 1997;36:72.
ABI PRISM~ DNA sequencing : Chemistry guides. Perkin-Elmer, Foster City, CA., USA. 1995:1-3.
Sanguansermsri T, Utravichia J, Kunaviktikul C, et al. Prenatal diagnosis of Hb Bart's hydrops fetalis. J Ped Soc Thai 1990;29:34-41.
Ko TM, Tseng LH, Hsu PM. et al. Ultrasonographic scanning of placental thickness and the prenatal diagnosis of homozygous alpha-thalassaemia 1 in the second trimester. Prenat Diagn 1995;15:7-10.
Kanokpongsakdi S, Fucharoen S, Vatanasiri C. et al. Ultrasonographic method for detection of haemoglobin Bart's hydrops fetalis in the second trimester of pregnancy. Prenat Diagn 1990;10:809-13
Tongsong T, Wanapirak C, Sirivatanapa P, Sanguansermsri T, et al. Eradication of Hb Bart's Hydrops Fetalis by Prenatal Strategy. บทคัดย่อ Fourth National Conference On Thalassemia เชียงไหม่ 2-4 กันยายน 2541:FP4.
Torcharus K, Sriphaisal T, Krutvacho T, et al. Prenatal diagnosis of Hb Bart's hydrops fetalis by PCR technique: Premongkutklao experience. Southeast Asian J Trop Med Public Health 1995:26:287-90.
Winichagoon P, Fucharoen S, Kanokpongskdi S, Fukumaki Y. Detection of OL-thalassemia 1 (Southeast Asian type) and its application for prenatal diagnosis. Cli Genet 1995;47:318-20
Chang JG, Lee LS, Lin CP, Chen PC. Rapid diagnosis of Ol-thalassemia 1 of Southeast Asian type and hydrops fetalis by polymerase chain reaction. Blood 1991;78:853-4.
Bowden DK, Vickers MA, Higgs DR. A PCR-base strategy to detect the common severe determinants of alpha-thalassemia. Br J Haematol 1995;81:104-8.
Torcharus K, Ketpunya A, Sriphaisal T, et al. Prenatal Diagnosis of Homozygous Alpha-Thalassemia 1 of Southeast Asian Type by Polymerase Chain Reaction. Thai J Hematol Transt Med 1998;8:33-8.
Kor-anantakul O, Suwanrath C, Leetanapor R, et al. Prenatal Diagnosis of Thalassemia in Songklanagarind Hospital. บทคัดย่อ Fourth National Conference On Thalassemia เชียงใหม่ 2-4 กันยายน 2541:SP10.
Fucharoen S, Winichagoon P, Wisedpanichkkij R, et al. Prenatal and postnatal diagnosis of thalassemias and hemoglobinopathies by HPLC. Clin Chem 1998;44:740-8.
Chowthaworn J, Winichagoon P, Sripanich R, SaeNgow B, Kanokpongsakdi S, Fucharoen S. Prenatal diagnosis for thalassemia by the automated HPLC. บทคัดย่อ Fourth National Conference on Thalassemia เชียงใหม่ 2-4 กันยายน 2541:FP 9.
ดาวน์โหลด
เผยแพร่แล้ว
ฉบับ
ประเภทบทความ
สัญญาอนุญาต
อนุญาตภายใต้เงื่อนไข Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
