Study of the quality of leukodepleted pooled platelet concentrates (LDPPC) treated with pathogen inactivation: amotosalen - UVA light treatment through 7 days of storage

Abstract

Abstracts:

Introduction: The problem of microbial contamination of platelets is widespread. Currently, National Blood Centre, Thai Red Cross Society has prevented and detected microbial contamination by using bacterial cultures in all platelet units. However, this method has its limitations. The incubation period for the growth of the microorganisms should be long enough to obtain the optimal number of organisms detectable by the machine. To solve this problem, pathogen inactivation technology, a technology to inhibit the growth of microorganisms, was studied in LDPPC production. Objective: To investigate the quality of pathogen inactivation treated leukodepleted pooled platelet concentrates (LDPPC): amotosalen - UVA light treatment after 7 days of storage. Materials and Methods: A total of 120 units of whole blood were used to prepare 30 units LDPPC by the buffy coat method. The quality of LDPPC was assessed before pathogen inactivation by testing for volume, platelet count, leukocyte content, pH and swirling phenomenon. Pathogen inactivation was performed by the amotosalen - UVA light treatment method. LDPPC with PI were stored at 20-24 °C in platelet incubator and examined for their quality on day 2, day 5 and day 7 for preparation volume, platelet count, pH, swirling phenomenon and bacterial cultures. Results: Testing before pathogen inactivation treatment, volume was 314.31±9.82 mL, platelet count was 327.21±26.19×10⁹ per bag, leukocyte content was 0.04±0.02×10⁶ per bag, pH was 7.15±0.03, swirling phenomenon was 5+ and red blood cell was 0.03±0.01 ×10⁶ per bag. After treatment with pathogen inactivation on day 2, volume was 289.02±9.73 mL, platelet count was 279.11±22.24×10⁹ per bag, pH was 7.04±0.03, and swirling phenomenon was 5+. On day 5 volume was 289.02±9.73 mL, platelet count was 266.12±22.32×10⁹ per bag, pH was 7.26±0.04, and swirling phenomenon was 5+. On day 7 volume was 289.02±9.73 ml, platelet count was 263.89±23.13×10⁹ per bag, pH was 7.13±0.07, and swirling phenomenon was 5+. The bacterial culture test was negative at day 2, 5 and 7. Conclusion: The results of LDPPC treated with pathogen inactivation were within the standard of National Blood Centre, Thai Red Cross Society during the 7 days of storage.

บทคัดย่อ

บทนำ  การปนเปื้อนเชื้อจุลชีพในส่วนประกอบโลหิตประเภทเกล็ดเลือด เป็นปัญหาที่พบบ่อย ปัจจุบันศูนย์บริการโลหิตแห่งชาติ สภากาชาดไทย มีมาตรการในการป้องกันและตรวจสอบการปนเปื้อนของเชื้อจุลชีพ โดยใช้วิธี bacterial culture ในส่วนประกอบโลหิตประเภทเกล็ดเลือดเข้มข้นทุกถุง ซึ่งวิธีนี้ยังมีข้อจำกัด ในด้านระยะเวลาที่ใช้เพื่อการเจริญเติบโตของเชื้อจุลชีพให้มีจำนวนมากพอที่เครื่องจะสามารถตรวจวัดได้ ดังนั้นเพื่อแก้ปัญหานี้จึงทำการศึกษาโดยใช้เทคโนโลยี pathogen inactivation ซึ่งเป็นเทคโนโลยีการยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อจุลชีพในการผลิต LDPPC วัตถุประสงค์ เพื่อศึกษาถึงคุณภาพของ LDPPC ที่ผ่านการทำ pathogen inactivation ด้วยวิธี amotosalen–UVA light treatment เมื่อเก็บรักษาเป็นระยะเวลา 7 วัน วัสดุและวิธีการ  ใช้โลหิตรวมจำนวน 120 ยูนิต นำมาผลิตเป็น LDPPC จำนวน 30 ยูนิต โดยวิธี buffy coat method และนำ LDPPC ไปตรวจคุณภาพก่อนการทำ pathogen inactivation โดยวัด volume, platelet count, leukocyte content, pH และ swirling phenomenon จากนั้นนำ LDPPC ที่ผลิตได้ไปผ่านการทำ pathogen inactivation และนำไปตรวจคุณภาพในวันที่ 2, 5 และ 7 ของวันที่ผลิต โดยวัด volume, platelet count, pH, swirling phenomenon และทำการทดสอบ bacterial culture   ผลการศึกษา  การทดสอบก่อนทำ pathogen inactivation พบว่า ใน 1 ถุงของ LDPPC มีปริมาตร 314.31±9.82 มิลลิลิตร ปริมาณเกล็ดเลือด 327.21±26.19×10⁹ เซลล์ ปริมาณเม็ดเลือดขาว 0.04±0.02×10⁶ เซลล์ ค่า pH 7.15±0.03 ค่า swirling 5+ และปริมาณเม็ดเลือดแดง 0.03±0.01 ×10⁶ เซลล์ การทดสอบหลังการทำ pathogen inactivation ในวันที่ 2 พบว่า LDPPC with PI มีปริมาตร 289.02±9.73 มิลลิลิตร ปริมาณเกล็ดเลือด 279.11±22.24×10⁹ เซลล์ ค่า pH 7.04±0.03 และ swirling 5+ ในวันที่ 5 พบว่า LDPPC with PI มีปริมาตร 289.02±9.73 มิลลิลิตร ปริมาณเกล็ดเลือด 266.12±22.32×10⁹ เซลล์ ค่า pH 7.26±0.04 และ swirling 5+ ในวันที่ 7 พบว่า LDPPC with PI มีปริมาตร 289.02±9.73 มิลลิลิตร ปริมาณเกล็ดเลือด 263.89±23.13×10⁹ เซลล์ ค่า pH 7.13±0.07 และ swirling 5+ สำหรับผลการทดสอบ bacterial culture negative ในวันที่ 2, 5 และ 7  สรุป  การศึกษาถึงคุณภาพของ leukodepleted pooled platelet concentrates (LDPPC) ที่ผ่านการทำ pathogen inactivation ด้วยวิธี amotosalen–UVA light treatment เมื่อเก็บรักษาเป็นระยะเวลา 7 วัน พบว่าปริมาณเกล็ดเลือด ปริมาณเม็ดเลือดขาว ค่า pH swirling และผลการทดสอบ bacterial culture อยู่ในเกณฑ์มาตรฐานของศูนย์บริการโลหิตแห่งชาติตลอดระยะเวลา 7 วัน ที่ทำการศึกษา ดังนั้น การทำ pathogen inactivation ด้วยวิธี amotosalen–UVA light treatment สามารถนำมาใช้ในการผลิต LDPPC ได้