การศึกษาผลของระยะเวลาในการเก็บตัวอย่างเลือดต่อการแสดงออกของ CD59 บนเม็ดเลือดที่วิเคราะห์ โดย flow cytometry

บทคัดย่อ

บทคัดย่อ : การวิจัยนีศึกษาถึงผลของระยะเวลาในการเก็บตัวอย่างเลือดต่อการวิเคราะห์การแสดงออกของ CD59 บนเม็ดเลือดแดงและแกรนูโลไซต์ (granulocyta) โดยใช้ flow cytometry เพื่อตรวจหาเม็ดเลือดที่ขาด CD59 (PNH cell) โดยการวิเคราะห์การแสดงออกของ CD59 บนเม็ดเลือดแดงที่ใช้ EDTA และ heparin เป็นสารกันเลือดแข็ง และการวิเคราะห์การแสดงออกของ CD59 บนแกรนูโลไซต์ที่ใช้ heparin เป็นสารกันเลือดแข็ง ตัวอย่างเลือดที่นำมาศึกษาได้มาจากคนปกติ, ผู้ป่วย aplastic anemia (AA), ผู้ป่วย myelodysplastic syndrome (MDS), ผู้ป่วย lymphoma กลุ่มละ 10 ราย และผู้ป่วย paroxysmal nocturnal hemogiobinuria (PNH) 13 ราย ทำการศึกษาโดยเก็บตัวอย่างเลือดไว้ที่อุณหภูมิห้อง ที่ระยะเวลา 0 ชั่วโมง, 24 ชั่วโมง และ 48 ชั่วโมง และวิเคราะห์เปอร์เซ็นต์ของเม็ดเลือดที่มีการแสดงออกของ CD59 บนเม็ดเลือดแดงและแกรนูโลไซต์ (%CD59 positive erythrocyte และ %CD59 positive granulocyte) ไม่พบความแตกต่างกันของเปอร์เซ็นต์ดังกล่าวในแต่ละช่วงเวลาอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (paired t-test, p>0.05) แต่พบว่า %CD59 positive granulocyte บางตัวอย่างเลือดที่เก็บไว้นาน 48 ชั่วโมง มีเปอร์เซ็นต์ต่างไปจากตัวอย่างเลือดที่ตรวจ ภายใน 24 ชั่วโมง (-1%) เมื่อวิเคราะห์ %CD59 positive erythrocyte โดยใช้สารกันเลือดแข็ง EDTA เปรียบเทียบกับ heparin พบว่าไม่มีความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (t-test, p>0.05) ดังนั้นสรุปได้ว่าตัวอย่างเลือดที่ใช้ EDTA หรือ heparin เป็นสารกันเลือดแข็งเหมาะสมสำหรับส่งวิเคราะห์การแสดงออกของ CD59
บนเม็ดเลือดแดงยังห้องปฏิบัติการต่างสถานที่ โดยระยะเวลาของการเก็บเลือดจนถึงเวลาวิเคราะห์ไม่เกิน 48 ชั่วโมงสำหรับการวิเคราะห์การแสดงออกของ CD59 บนแกรนูโลไชต์นั้น สารกันเลือดแข็งที่หมาะคือ heparin และควรทำการวิเคราะห์ภายใน 24 ชั่วโมง หลังการเก็บตัวอย่างเลือด ทั้งนี้ปริมาณเลือดที่ต่ำที่สุดที่ใช้ในการวิเคราะห์คือ 2 มิลลิลิตร