แอนติเจนหมู่เลือดระบบ Lewis บนผิวเซลล์เม็ดเลือดแดงและในน้ำลายของผู้บริจาคโลหิตไทย
Keywords:
Lewis blood group, Saliva substances, ABH secretor, Lewis antigensAbstract
บทคัดย่อ
แอนติเจนหมู่เลือดระบบ Lewis มีความหลากหลายในการแสดงออกสูง เนื่องจากเป็นแอนติเจนในพลาสมา แล้วถูกเม็ดเลือดแดงดูดซับมาอยู่บนผิวเยื่อหุ้มเซลล์เม็ดเลือดแดง มีความเกี่ยวข้องใกล้ชิดกับยีน ABH secretor การระบุ phenotype ของหมู่เลือดระบบ Lewis เป็นเรื่องยากในผู้บริจาคโลหิตบางราย เนื่องจาก cross-reactivity ของแอนติซีรัมชนิดโมโนโคลนัลของบริษัทผู้ผลิต สารหมู่เลือด Lewis อาจตรวจ ได้ในน้ำลายของผู้บริจาคโลหิตบางราย วัตถุประสงค์ เพื่อทดสอบความสอดคล้องระหว่างผลการตรวจแอนติเจน Lewis บนผิวเม็ดเลือดแดงและการตรวจสาร Lewis ในน้ำลาย วัสดุและวิธีการ ตัวอย่างเลือดและน้ำลายจากผู้บริจาคโลหิตจำนวน 206 ราย ระหว่างวันที่ 22 กรกฎาคม พ.ศ. 2559 ถึง 26 สิงหาคม พ.ศ. 2559 น้ำลายหลังจากทำการต้มในน้ำเดือด นำมาปั่นแยกเอาน้ำใสข้างบนเก็บแช่แข็งที่ -30 องศาเซลเซียส จนกระทั่งนำมาทดสอบ ตรวจสาร Lewis ในน้ำลายด้วยวิธี hemagglutination inhibition test (HAI) ตรวจแอนติเจนบนผิวเม็ดเลือดแดงด้วยวิธี hemagglutination ผลการศึกษา phenotype ของหมู่เลือด Lewis บนผิวเม็ดเลือดแดงและสาร Lewis ในน้ำลายจากจำนวน 206 ราย แบ่งเป็น 2 กลุ่ม คือ กลุ่ม secretor ตรวจพบ phenotype ได้ 2 แบบ คือ Le (a-b+) และ Le (a-b-) ในผู้ที่มี Le (a-b+) จำนวน 118 ราย ซึ่งมีจำนวน 101 ราย ที่หลั่งทั้งสาร Lea และ Leb ในน้ำลาย อีก 17 ราย พบแต่สาร Leb เท่านั้น และพบ Le (a-b-) ซึ่งไม่พบสาร Lewis ในน้ำลายจำนวน 28 รายสำหรับกลุ่ม non secretor พบ 2 phenotypes 2 แบบ คือ phenotypes Le (a+b-) และ Le (a-b-) พบคนที่เป็นเป็น Le (a+b-) ที่หลั่งสาร Lea ในน้ำลาย 48 ราย และเป็น Le (a-b-) 8 ราย ที่ไม่พบสาร Lewis ในน้ำลาย สำหรับกลุ่มที่หลั่งสาร ABH อ่อน ที่พบในการศึกษานี้ 4 ราย มี phenotype เป็น Le (a+b+) 3 ราย ที่หลั่งทั้งสาร Lea และ Leb ในน้ำลาย อีก 1 ราย หลั่งสาร Lea ชนิดเดียว ผลที่ได้สอดคล้องกับทฤษฎี คือ ผู้ที่มี phenotype บนเม็ดเลือดแดงเป็น Le (a+b-) เป็น ABH non-secretor ผู้ที่มี phenotype บนเม็ดเลือดแดงเป็น Le (a-b+) จะเป็น ABH (secretor) ผู้ที่มี phenotype บนเม็ดเลือดแดงเป็น Le (a-b-) จะเป็น ABH (secretor) หรือ ABH (non-secretor) ก็ได้ ผู้ที่มี phenotype บนเม็ดเลือดแดงเป็น Le (a+b+) เป็น weak ABH secretor สรุป เมื่อผลการตรวจ Lewis phenotype จากเม็ดเลือดแดงไม่สามารถแปลผลได้ชัดเจน ควรตรวจ Lewis substance ในน้ำลาย สำหรับผู้บริจาคโลหิตบางรายที่ได้ผลจากทั้งสองวิธีไม่สอดคล้องกัน ควรใช้วิธีการตรวจในระดับโมเลกุลเพิ่มเติม
Abstract:
Lewis blood group antigens are highly diversity in expression as they are plasma antigens which are adsorbed onto red blood cells membrane and are also closely related with ABH secretor genes. Lewis phenotypes are very difficult to indicate due to cross-reactivity of commercially available monoclonal antisera. In blood donors who have Lewis gene, Lewis substances may also be found in their saliva. Objective: To test for the concordance between Lewis antigens on red blood cell and Lewis substances in saliva in Thai blood donors. Materials and Methods: Blood and saliva samples for detection of Lewis antigens and Lewis substances from 206 blood donors during July 22 to Aug 26, 2016 were included in this study. The hemagglutination inhibition test and hemagglutination test were used for saliva and red blood cell testing, respectively. Results: ABH secretor status, Lewis phenotype and Lewis substances in saliva found were as follows: in secretor group, two phenotypes were found including Le (a-b+) and Le (a-b-). A total of 101 subjects were Le (a-b+) which secreted Lea and Leb substances in their saliva while 17 individuals possessed only Leb substance. In addition, Lewis substance was not found in the saliva of 28 Le (a-b-) subjects. In ABH non-secretor group, two phenotypes including Le (a+b-) and Le (a-b-) were found. Lea substance in saliva was found in 48 of Le (a+b-) phenotype while Lewis substance was not found in 8 subjects of Le (a-b-) phenotype. Furthermore, in the weak ABH secretor group, we found 4 cases of Le (a+b+) phenotype, which 3 subjects secreted Lea and Leb substances in saliva while the other one secreted only Lea substance. Our results are consistent with the theory that; Le (a+b-) phenotype is ABH non-secretor, Le (a-b+) phenotype is ABH secretor, Le (a-b-) phenotype is ABH secretor or ABH non-secretor and Le (a+b+) phenotype is weak ABH secretor. Conclusion: Whenever Lewis phenotypes on red cells were inconclusive, the study of Lewis substances in saliva should be performed. In addition, some blood donors who have mismatched results, molecular method should be considered.
Downloads
References
1. Henry S, Gilliver L. Review: Biochemistry of carbohydrate blood group antigens. Immunohematology. 2003;19:33-
42.
2. Henry S, Oriol R, Samuelsson B. Lewis histo-blood group system and associated secretory phenotypes. Vox Sang.
1995;69:166-82.
3. Chandanyingyong D. Lewis blood group system. In: Transfusion Medicine. Faculty of Medicine Siriraj Hospital,
Mahidol University, Thailand. 1998:85-90.
4. Kerdkaewmgam K, Tubrod J. The differences of nine blood groups system in the three major ethnicities of human.
J Med Tech Assoc Thailand. 2015;43:5127-40.
5. Harmening DM. The Lewis system. In: Modern blood banking and transfusion practices. 4th ed. Baltimore: FA
Davis company. 1999:145-60.
6. Combs MR. Lewis blood group system review. Immunohematology. 2009;25:112-8.
7. Yazawa S, Oh-kawara H, Nakajima T, Hosomi O, Akamutsu S, Kishi K. Histo-blood group Lewis genotyping from
human hairs and blood. Jpn J Human Genet. 1996;41:177-88.
8. Dabrowski J, Hanfland P, Egge H, Dabrowski U. Immunochemistry of the Lewis blood group system: Proton
nuclear magnetic resonance study of plasmatic Lewis blood group active glycosphingolipids and related
substances. Arch Biochem Biophys. 1981;210:405-11.
9. Kong SP, Chiewsilp P, Tubrod J, Deesin P. ABH secretor status in the Thai population. J Hematol Transfus Med.
2016;26:199-205.
10. Combs MR. Method Section 2-8 Testing saliva for A, B, H, Lea, and Leb antigens section 2 red cell typing. In:
Roback JD, Combs MR, Grossman BJ, Hillyer CD, eds. Technical manual 16th ed. Bethesda, MD: American
Association of Blood Banks; 2008:883-5.
11. Henry SM, Benny AG, Woodfield DG. Investigation of Lewis phenotype in polynesians: evidence of a weak secretor
phenotype. Vox Sang. 1990;58:61-6.
12. Chandanayingyong D, Sasaki TT, Greenwalt TJ. Blood group of the Thais. Transfusion. 1967;7:269-76.
13. Calderron RF, Campillo FM, Escudero MC, Gallardo L. Lewis phenotype and secretor character in the “Castilla la
Nueva”-region (Spain). ABH and Lewis antigen level in salivary secretion. Anthrop. Anz.1984;42:31-9.
14. Kremastinou J, Tzanakaki G, Karafoti PH, Elton RA, Weir DM, Blackwell CC. Distribution of ABO and Lewis blood
groups in Greece. Gene Geogr. 1996;10:201-5.
15. Herry SM, Simpson LA, Woodfield DG. The Le(a+b+) phenotype in Polynesians. Hum. Hered. 1988;38:111-6.
16. Broadberry RE, Lin-Chu M. The Lewis blood group system among Chinese in Taiwan. Hum. Hered. 1991;41:290-4.
17. Broadberry RE, Lin-Chu M. Comparison of the Lewis phenotypes among the different population groups of Taiwan.
Transfus Med. 1996;6:255-60.
18. Mothan L. Lewis phenotypes of American caucasians, American negroes and their children. Vox Sang. 1980;39:
327-30.
19. Akhter S, Kibria GM, Akhter NR, Habibullah MM, Islam SMK, Zakariah M. ABO and Lewis blood grouping with ABH
secretor and non-secretor status: A cross sectional in Dhaka. Faridpur Med. Coll. J. 2011;6:38-40.
20. Mollison PL. The Lewis system. In: Blood transfusion in clinical medicine. 10th ed. Victoria: Blackwell Science Ltd;
1997:132-8.
21. Kupatawintu P, Emtip M, Sungnoon D, Ovataga P, Manakul V, Limtamaporn S, Tubrod J. Unexpected antibodies of
patient’ blood samples sent for testing at NBC. TRCS. J Hematol Transfus Med. 2010;20:255-62.
22. Ratanasirivannich P, Chiewsilp P. Red cell antibody pattern in Thai pregnant women. Thai J Hematol Med. 1996;6:
131-3.
23. Romphruk A, Urwijitaroon Y, Puapairoj C, Akkahart C, Pachoat L, Pattayaso P. Unexpected antibodies in
northeastern-Thai. Thai J Hematol Transf Med. 1994;4:135-40.
