การพัฒนาวิธีการตรวจเอกลักษณ์ของโมโนโคลนอลแอนติบอดีด้วยวิธี แคปิลลารีไอโซอิเล็กทริกโฟกัสซิ่ง
Article Sidebar
Main Article Content
บทคัดย่อ
บทนำ: ปัจจุบันมีการนำเข้าโมโนโคลนอลแอนติบอดีซึ่งผลิตโดยเทคโนโลยีชีวภาพสู่ประเทศไทยจำนวนมาก และเนื่องจากเป็นยาโปรตีนซึ่งมีกระบวนการผลิตที่ซับซ้อนหากการควบคุมคุณภาพไม่เพียงพอจะทำให้คุณภาพของยาไม่สมํ่าเสมอเกิดเป็นไอโซฟอร์ม (isoforms) ที่อาจมีผลต่อประสิทธิภาพและความปลอดภัยดังนั้นจึงได้พัฒนาวิธีแคปิลลารีไอโซอิเล็กทริกโฟกัสซิ่ง (capillary isoelectric focusing: cIEF) เพื่อการตรวจเอกลักษณ์ของยาโดยอาศัยความแตกต่างของจุดไอโซอิเล็กทริก (isoelectric point: pI) ของโมเลกุลโปรตีน วิธีดำเนินการวิจัย: ทำการตรวจสอบความใช้ได้ของวิธี cIEF โดยใช้เครื่องอิเล็กโทรโฟรีซิสแบบแคปิลลารี PA 800 Beckman Coulter ตามสภาวะที่กำหนด และใช้ยาโปรตีนชนิดโมโนโคลนอลแอนติบอดีและ granulocyte colony stimulating factor ในการศึกษา ผลการวิจัย: วิธี cIEF สามารถแยกโมโนโคลนอลแอนติบอดีออกจาก peptide markers และโปรตีนอื่น ได้ค่า pI ที่จำเพาะมีความเที่ยงทั้งการวิเคราะห์ในวันเดียวกันและระหว่างวัน โดยมีร้อยละของค่าการเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ (%RSD) ของ pI ของพีคหลักน้อยกว่า 0.3 มีความคงทนที่ดีแม้เปลี่ยนผู้วิเคราะห์ แคปิลลารีและเจลต่างรุ่นก็ไม่มีผลกระทบต่อความถูกต้องของวิธี ได้ค่า %RSD ของ pI ของทุกพีคหลักน้อยกว่า 0.9 ผลการตรวจเอกลักษณ์ของยาโมโนโคลนอลแอนติบอดีด้วยวิธีที่พัฒนาขึ้นนี้เทียบได้กับสารมาตรฐานทั้งค่า pI และลักษณะของพีค สรุปผลการวิจัย: ดังนั้นวิธี cIEF นี้จึงเหมาะสมในการนำมาเป็นหนึ่งในวิธีตรวจเอกลักษณ์ยาโมโนโคลนอลแอนติบอดีเพื่อการควบคุมยาก่อนและหลังจำหน่ายสู่ตลาด
Article Details
กรณีที่ใช้บางส่วนจากผลงานของผู้อื่น ผู้นิพนธ์ต้อง ยืนยันว่าได้รับการอนุญาต (permission) ให้ใช้ผลงานบางส่วนจากผู้นิพนธ์ต้นฉบับ (Original author) เรียบร้อยแล้ว และต้องแนบเอกสารหลักฐาน ว่าได้รับการอนุญาต (permission) ประกอบมาด้วย
เอกสารอ้างอิง
Dubel S. Recombinant therapeutic antibodies. Appl Microbiol Biotechnol 2007; 74: 723-29.
European Directorate for the Quality of Medicine & HealthCare (EDQM). European Pharmacopoeia 2011 volume I. Nördlingen: Druckerei C.H. Beck; 2010; 77-82.
European Directorate for the Quality of Medicine & HealthCare (EDQM). European Pharmacopoeia, 2011 volume I. Nördlingen: Druckerei C.H. Beck; 2010: 692-3.
FDA. Food and Drug Administration. http://drug.fda.moph.go.th/zone_service/ser020.asp.
Hunt G, Hotaling T, Chen AB. Validation of a capillary isoelectric focusing method for the recombinant monoclonal antibody C2B8. J Chromatogr A. 1998; 800:355–67.
Hunt G., Moorhouse KG, Chen AB. Capillary isoelectric focusing and sodium dodecyl sulfate-capillary gel electrophoresis of recombinant humanized monoclonal antibody HER2. J Chromatogr A 1996; 744 (1-2): 295-301.
Jefferis R. Recombinant antibody therapeutics: the impact of glycosylation on mechanisms of action. Trends Pharmacol Sci 2009; 30(7): 356-62.
Jenkins MA, Ratnaike S. Capillary isoelectric focusing of haemoglobin variants in the clinical laboratory. Clinica Chimica Acta 1999; 289: 121–132.
Kindt TJ, Goldsby RA, Osborne BA. editors. Kuby IMMUNOLOGY. 6th edition. New York: W.H. Freeman and Company. 2006; 85-9.
Little MJ, Paquette DM, Roos PK. Electrophoresis of pharmaceutical proteins: Status quo. Electrophoresis 2006; 27(12): 2477–2485.
Mack S, Cruzado-Park, ID, Ratnayake CK, Application Information Bulletin A-12026 A: High Resolution cIEF of Therapeutic Monoclonal Antibodies: A Platform Method Covering pH 4-10, Beckman Coulter, Inc., Fullerton, CA, 2008. [cited 2013 December 16]. Available from: https://www.beckmancoulter.com/wsrportal/bibliography?docname=A-12026A.pdf.
Maeda E., Urakami K., Shimura K., et al. Charge heterogeneity of a therapeutic monoclonal antibody conjugated with a cytotoxic antitumor antibiotic, calicheamicin. J Chromatogr A 2010; 1217: 7164–7171. Pharmacopoeia Convention. The United States Pharmacopoeia, the National Formulary: USP 36, NF 31 2013. United States Pharmacopoeia Convention. Rockville (MD): The United States Pharmaceutical Convention; 2013. 629-632.
Pharmacopoeia Convention. The United States Pharmacopoeia, the National Formulary: USP 36, NF 31 2013. United States Pharmacopoeia Convention. Rockville (MD): The United States Pharmaceutical Convention; 2013. 551.
Righetti PG. Determination of the isoelectric point of proteins by capillary isoelectric focusing. J Chromatogr A 2004; 1037: 491–99.
Roche. Biotechnology - New Directions in Medicine. 3rd edition. Basel: F. Hoffmann-La Roche Ltd. 2008.
Santora LC, Krull IS, Gran KT. Characterization of Recombinant Human Monoclonal Tissue Necrosis Factor-α Antibody Using Cation-Exchange HPLC and Capillary Isoelectric Focusing. Analytical Biochemistry 1999; 275: 98–08.
Shukla AA, Thommes J. Recent Advances in Large-Scale Production of Monoclonal Antibodies and Related Proteins. Trends Biotechnol 2010; 28(5): 253-61.
Sosic XZ, Krull IS. Capillary isoelectric focusing as a tool in the examination of antibodies, peptides and proteins of pharmaceutical interest. J Chromatogr 1996; 735:165-90.
Tang S, Nesta DP, Maneri LR, Anumula KR. A method for routine analysis of recombinant immunoglobulins (rIgGs) by capillary isoelectric focusing (cIEF). J Pharm Biomed Anal 1999; 19(3-4) 569–83.
World Health Organization. WHO Technical Report Series No. 977. World Health Organization. Geneva. 2013; 51-89.
Zhao SS, Chen DY. Applications of capillary electrophoresis in characterizing recombinant protein therapeutics Electrophoresis 2014; 35(1): 96–108.
Zhou GH, Luo GA, Sun GQ, Cao YC, Zhang XD, Zhang X. Characterization of recombinant human granulocyte colony stimulating factor (rHuG-CSF) by capillary zone electrophoresis, capillary isoelectric
focusing electrophoresis and electrospray ionization mass spectrometry. J Pharm Biomed Anal 2004; 35(3):425-32.
