Immune Response of Lion’s paw Scallop Nodipecten subnodosus (Sowerby, 1835) Challenged with Vibrio alginolyticus

Abstract

บทคัดย่อ

การศึกษาการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของหอยแครงตีนสิงโต Nodipecten subnodosus (Sowerby, 1835) ต่อเชื้อ Vibrioalginolyticus สายพันธุ์ APSA2 โดยพิจารณาจากกิจกรรมของไลโซโซมอลเอนไซม์ ขนาดและจำนวนของเซลล์เม็ดเลือด โดยทำการเก็บตัวอย่างจาก hemocyte lysate supernatant (HLS) และพลาสม่า ในเวลา 6 และ 24 ชั่วโมง และ 3 6 และ 10 วัน หลังจากการท้าทายด้วยเชื้อ การวัดกิจกรรมของเอนไซม์ทำโดยการวัดด้วยวิธี colorimetric และ lysoplate assay ผลการศึกษาพบว่ากิจกรรมของเอนไซม์ที่วัดด้วยวิธี colorimetric มีความแตกต่างกันเมื่อเก็บตัวอย่างที่เวลาต่างกัน และยังพบว่ากิจกรรมของเอนไซม์ใน HLS มีค่าสูงกว่าในพลาสม่าอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ นอกจากนั้นยังพบด้วยว่าใน HLS มีจำนวนเอนไซม์หลากชนิดว่าในพลาสม่า โดยเอนไซม์ที่พบว่ามีกิจกรรมสูงทั้งในHLS และในพลาสม่า ได้แก่ leucyl arylamidase และ esterase ในขณะที่กิจกรรมของไลโซโซมอลเอนไซม์ ไม่พบว่ามีความแตกต่างกันเมื่อเก็บตัวอย่างที่เวลาต่างกัน อย่างไรก็ตามพบว่ากิจกรรมของไลโซโซมอลเอนไซม์ในพลาสม่ามีค่ามากกว่าใน HLS อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ เป็นข้อบ่งชี้ว่าไลโซไซม์อาจถูกหลั่งจากเซลล์เม็ดเลือดเข้าสู่พลาสม่า แสดงถึงการตอบสนองแรกต่อการท้าทายของเชื้อ นอกจากนั้นยังพบว่ามีความสัมพันธ์ในเชิงลบระหว่างระดับโปรตีนในพลาสม่ากับใน HLS จากผลการศึกษาดังกล่าวนักวิจัยเชื่อว่ากลไกในการตอบสนองของหอยชนิดนี้ต่อการติดเชื้อแบคทีเรีย อาศัยเซลล์เม็ดเลือดและไลโซโซมอลเอนไซม์

คำสำคัญ: เซลล์เม็ดเลือด ไฮโดรไลติกเอนไซม์ หอยแครงตีนสิงโต Nodipecten subnodosus pectinid

Abstract

Immune response of Lion’s paw scallop Nodipecten subnodosus to the challenge of Vibrio alginolyticus strainAPSA2 was studied through the characterization of the activity of lysosomal enzymes and hemocyte size andnumber. Samples were obtained as hemocyte lysate supernatant (HLS) and plasma, after 6 and 24 hours, and 3, 6, and10 days after challenge. The enzymatic activity was tested by colorimetric and lysoplate assay techniques. Betweensampling times, significant differences in enzymatic activity determined by the colorimetric technique were found.The enzymatic activity was significantly higher in HLS than in plasma; in addition more enzymes were detected inHLS as compared with plasma. The enzymes with higher activity were leucyl arylamidase and esterase in both, HLSand plasma. Lysozyme-like activity did not show significant differences between the sampling times. However, inplasma the lysozyme-like activity was significantly higher than in HLS, suggesting that lysozyme was released fromhemocytes into plasma as a first response to the challenge. A significantly negative correlation was found betweenprotein concentration in plasma and in HLS. Based on the findings reported here, we can affirm that hemocytes andlysosomal enzymes are two of the mechanisms that this species has to fight bacterial attacks.

Keywords: hemocyte, hydrolytic enzymes, Nodipecten subnodosus, pectinid