Presence of Infectious Pancreatic Necrosis Virus on Rainbow Trout (Oncorhynchus mykiss) by Histopathology, ELISA and RT-PCR
Keywords:
ELISA, infectious pancreatic necrosis, ปลาเรนโบว์เทราท์, reverse transcription polymerase chain reaction, troutAbstract
บทคัดย่อ
อุตสาหกรรมการเพาะเลี้ยงปลาเรนโบว์เทราท์ (Oncorhynchus mykiss) ในประเทศเม็กซิโก เคยประสบปัญหาการตายของปลาซึ่งพบว่าอาการดังกล่าวมีความสัมพันธ์กับโรคติดเชื้อไวรัส infectious pancreatic necrosis virus disease (IPNV) วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้เพื่อศึกษาศักยภาพของวิธีการวินิจฉัยโรค IPNV โดยวิธี ELISA จุลพยาธิวิทยา และ RT-PCR. โดยทำการศึกษาในฟาร์มปลาเรนโบว์เทราท์ จำนวน 14 ฟาร์มที่เคยพบการระบาดของโรค พบว่าร้อยละ 21 ของตัวอย่างทั้งหมดที่เก็บจากฟาร์มให้ผลบวกทั้ง 3 วิธี การตรวจหาแอนติเจนของไวรัส โดยวิธี ELISA และ RT-PCR สามารถที่ให้ผลบวกภายในวันที่ 2 ของวันที่ปลาเริ่มป่วย ซึ่งทำการยืนยันผลโดยวิธีทางจุลพยาธิวิทยาที่สามารถตรวจพบรอยโรคในวันที่ 5 จากผลการศึกษาพบว่าวิธี ELISA และ RT-PCR มีความไว รวดเร็ว และเป็นแนวทางเลือกที่ดีในการวินิจฉัยโรค IPNV เมื่อเปรียบเทียบกับการเพาะแยกเชื้อไวรัส และการตรวจรอยโรคทางจุลพยาธิวิทยา ซึงสามารถนำวิธีดังกล่าวมาใช้ในการเฝ้าระวัง ควบคุมและป้องกันโรคในฟาร์มปลาได้เป็นอย่างดี
คำสำคัญ: ELISA, infectious pancreatic necrosis, ปลาเรนโบว์เทราท์, reverse transcription polymerase chain reaction
Abstract
Trout (Oncorhynchus mykiss) culture in Mexico experiences sporadic and significant fish mortalities, wheredisease signs are associated with infectious pancreatic necrosis virus disease (IPNV). The purpose of the present workwas to support the potential of ELISA, histopathology, and RT-PCR as routine techniques for IPNV detection.Fourteen trout farms were monitored after a disease outbreak. Positive results were confirmed in different collectedorganisms from 21% of tested farms by all 3 techniques. Virus detection by ELISA and RT-PCR was successfullyperformed in only two days after the initial signs of disease were observed in fish, since these methods are fasterwhen compared to histopathology, which only detected signs of disease such as necrosis of the pancreatic acinus andintestine after 5 days. The results suggest that ELISA and RT-PCR offer an early, sensitive, faster and cheaperalternative for the routine detection of IPNV compared to cell culture and histopathology. These techniques can beperformed for fish health monitoring and are reliable tools in the control, prevention and timely detection of IPNV.
Keywords: ELISA, infectious pancreatic necrosis, trout, reverse transcription polymerase chain reaction
