A Comparative Study on the Efficacy of Four Semen Extenders and Thawing by Seminal Plasma on the Quality of Frozenthawed Boar Semen

Abstract

บทคัดย่อ

การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลของสารละลายน้ำเชื้อพ่อสุกร 4 ชนิดที่ใช้ในการเก็บรักษาน้ำเชื้อหลังรีดเก็บน้ำเชื้อก่อนทำการแช่แข็ง และการใช้เซมินอลพลาสมาสำหรับทำละลายต่อคุณภาพของน้ำเชื้อพ่อสุกรหลังการแช่แข็ง รีดเก็บน้ำเชื้อพ่อสุกรจากส่วนที่มีอสุจิมากจากพ่อสุกร 11 ตัว แล้วนำมาแบ่งเป็น 4 กลุ่ม ตามชนิดของสารละลายน้ำเชื้อ 4 ชนิด (A B C และ D) น้ำเชื้อถูกนำมาเจือจางในสารละลายน้ำเชื้อแต่ละชนิด สารละลายน้ำเชื้อถูกทำให้เย็นลงแล้วนำมาปั่น ส่วนของเซลล์อสุจิที่ตกตะกอนถูกนำมาเจือจางด้วยสารละลายน้ำเชื้อชนิดที่มีไข่แดงและน้ำตาลแลคโต๊สเป็นส่วนประกอบร่วมกับสารกลีเซอรอลและสารอีเควกเอสทีเอ็มเพส น้ำเชื้อที่เจือจางแล้วถูกนำมาบรรจุในหลอดฟางขนาด 0.5 มิลลิลิตร แล้วนำไปแช่แข็ง ทำละลายน้ำเชื้อโดยการจุ่มหลอดบรรจุน้ำเชื้อในน้ำอุ่นอุณหภูมิ 50°ซ. นาน 12วินาที น้ำเชื้อถูกแบ่งเป็น 2 กลุ่ม กลุ่มควบคุมถูกเจือจางโดยสารละลายบีทีเอส และกลุ่มทดลองถูกเจือจางในเซมินอล พลาสมา สารละลายน้ำเชื้อถูกนำมาประเมินคุณภาพหลังการทำละลายซึ่งประกอบด้วย ร้อยละการเคลื่อนไหวเป็นรายตัว อัตราการมีชีวิตของอสุจิ ความสมบูรณ์ของเยื่อหุ้มเซลล์อสุจิ และความสมบูรณ์ของอะโครโซม ผลการทดลองพบว่าน้ำเชื้อพ่อสุกรที่ถูกทำละลายในสารละลาย D นาน 2 ชั่วโมงก่อนนำไปแช่แข็ง มีอัตราการเคลื่อนไหวเป็นรายตัวสูงกว่าน้ำเชื้อที่ทำละลายในสารละลายน้ำเชื้อชนิด B (20.9% และ 16.9%, p= 0.045) และมีแนวโน้มสูงกว่าสารละลายน้ำเชื้อชนิด A (17.5%, p= 0.090) การทำละลายน้ำเชื้อพ่อสุกรในสารละลายบีทีเอส ได้อัตราการเคลื่อนไหวเป็นรายตัวสูงกว่าการทำละลายน้ำเชื้อพ่อสุกรในเซมินอลพลาสมา (20.3% และ 16.9%, p= 0.021) ผลการศึกษาสรุปได้ว่าทั้งชนิดของสารละลายน้ำเชื้อที่ใช้เก็บรักษาน้ำเชื้อพ่อสุกรก่อนกระบวนการแช่แข็ง และชนิดของสารละลายที่ใช้ในการทำละลายน้ำเชื้อแช่แข็ง มีอิทธิพลต่อคุณภาพของน้ำเชื้อพ่อสุกรหลังการทำละลายอย่างมีนัยสำคัญ

คำสำคัญ : การแช่แข็ง, สุกร, อสุจิ, สารทำละลาย

Abstract

The present study investigated the influence of four different commercial semen extenders used during theholding time and the use of seminal plasma as a thawing medium on the frozen-thawed (FT) boar semen quality.Sperm-rich fractions were collected from 11 boars and were divided into four groups according to the type of semenextender used during the holding time (A, B, C and D). The extended semen was cooled down and centrifuged. Thesperm pellets were diluted in lactose-egg yolk extender plus glycerol and Equex STM Paste. The semen were loadedinto 0.5 ml straws and frozen. Thawing was achieved by immersing the straws in 500C water for 12 sec. The semenwas divided into two groups: the control group was diluted in BTS; the treatment group was diluted in seminalplasma. The post-thawed sperm qualities including subjective motility, sperm viability, functional integrity of thesperm plasma membrane and acrosome integrity were evaluated. It was found that semen extended in extender D for2 hours before cryopreservation yielded a higher individual motility than those extended in extender B (20.9% and16.9%, p= 0.045) and tended to be higher than those extended in extender A (17.5%, p= 0.090). Thawing ofcryopreserved boar semen in BTS yielded a significantly higher subjective motility than thawing in seminal plasma(20.3% and 16.9%, p= 0.021). It could be concluded that both types of extender used during the holding time and thethawing medium significantly influenced FT boar sperm quality.

Keywords : cryopreservation, pig, sperm, thawing medium